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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

전혜지 (호서대학교, 호서대학교 대학원)

지도교수
이진영
발행연도
2013
저작권
호서대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수8

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

초록· 키워드

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사람의 피부는 자외선, 오염된 공기, 화학제품 등 환경에 끊임없이 노출된다. 특히 자외선은 피부에 다양한 형태로 영향을 주어 주름, 잔주름, 피부거침, 피부건조와 같은 현상을 발생시켜 피부노화를 유발시킨다.
본 연구에서는 전 세계적으로 향나무과의 일종인 다년생 수목인 노간주나무(Juniperus rigida Sieb.) 추출물의 항산화효과와 미백 및 주름개선 효과에 대하여 검증하였다. 노간주나무 추출물의 항산화 측정으로 폴리페놀 함량을 측정한 결과 열수 추출물에서 71.3 ㎎/g, 에탄올 추출물에서 116.0 ㎎/g을 함유하고 있음을 확인하였으며, 플라보노이드 함량은 열수 추출물에서 17.7 ㎎/g, 에탄올 추출물에서 76.4 ㎎/g으로 나타났다. 전자공여능을 측정한 결과 노간주나무 열수 및 에탄올 추출물 1,000 ㎍/㎖에서 44.0%, 86.8%의 효과를 나타내어, 대조군으로 사용한 BHT와 유사한 효과를 나타내었으며, ABTS radical cation decolorization을 측정한 결과 1,000 ㎍/㎖에서 열수 추출물은 91.4%, 에탄올 추출물은 91.1%의 소거능을 나타내어 같은 농도의 ascorbic acid와 유사한 활성을 나타내었다. FRAP을 측정한 결과 노간주나무 열수 및 에탄올 추출물에서 1.83mM, 1.77mM으로 열수 추출물에서 더 높은 함량을 나타내었다. SOD 유사활성능을 측정한 결과 노간주나무 열수 및 에탄올 추출물은 1,000 ㎍/ml에서 43.4%, 32.3%의 활성을 나타내었으며, xanthine oxidase 저해활성능 측정 결과 열수 및 에탄올 추출물 1,000 ㎍/㎖에서 52.7%, 72.3%의 저해효과를 나타내었다.
미백효과를 확인하기 위하여 tyrosinase 저해활성을 측정한 결과 열수 추출물에서 49.4%, 에탄올 추출물에서 80.0%의 효과를 나타내어 열수 추출물에 비해 에탄올 추출물의 효과가 높게 나타났으며, 노간주나무 에탄올 추출물이 B16F10 흑세포종에 대하여 멜라닌 색소 생성 억제 및 tyrosinase, MITF, TRP-1, TRP-2의 억제 효과를 가지고 있는 것을 확인하였다.
주름개선 효과 측정으로 elastase 저해활성을 측정한 결과 노간주나무 열수 추출물 1,000 ㎍/㎖에서 10% 이하의 낮은 저해활성을 나타낸 반면에 노간주나무 에탄올 추출물의 1,000 ㎍/㎖에서 68.5%의 저해활성을 나타내었으며, collagenase 저해활성을 측정한 결과 1,000 ㎍/㎖에서 열수 및 에탄올 추출물은 44.9%, 97.2%로 에탄올 추출물의 경우 ascorbic acid (99.6%)와 유사한 효과로 높은 저해활성을 나타내었다. 또한 섬유아세포를 이용한 collagen 생합성량을 측정한 결과 노간주나무 에탄올 추출물 50 ㎍/㎖에서 151.52%의 생합성 촉진 효과를 나타내어 노간주나무 에탄올 추출물의 주름개선 효과가 우수하다는 것을 확인할 수 있었다. UVA에 의해 발현이 증가되는 MMP-1에 노간주나무 에탄올 추출물이 미치는 영향을 알아본 결과 노간주나무 에탄올 추출물은 100 ㎍/㎖에서 67.1%의 MMP-1의 발현 저해효과를 나타내었다. 노간주나무 에탄올 추출물의 MMP-1의 단백질 및 mRNA의 발현은 50 ㎍/㎖의 농도에서 각각 35%, 39%의 저해율을 나타냄에 따라 노간주나무 에탄올 추출물은 collagen을 분해하는 효소인 MMP-1의 발현을 억제하고 광노화에 의한 주름생성 억제 활성을 보이는 것을 확인하였다.
이와 같은 결과로 미루어 보아 열수 추출물보다 에탄올 추출물이 더 높은 효과를 나타냄을 확인할 수 있었으며, 노간주나무 추출물의 미백 및 주름개선 효과를 이용하여 기능성 화장품 소재로서의 가능성을 확인할 수 있었다.

목차

Ⅰ. 서론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 6
1. 실험재료 6
가. 재료 6
나. 시료 추출 6
다. 시약 및 기기 6
a. 항산화능 측정 시약 6
b. 미백 및 주름억제 효과 측정 시약 7
c. 세포 독성 측정에 사용된 세포주 및 시약 8
d. 실험에 사용된 기기 8
2. 실험 방법 9
가. 노간주나무 추출물의 항산화 효과 측정 9
a. 총 폴리페놀 함량 측정 9
b. 총 플라보노이드 함량 측정 9
c. 전자공여능 측정 9
d. ABTS 측정 10
e. Ferric-reducing antioxidant power (FRAP) 측정 10
f. Superoxide dismutase (SOD) 유사활성 측정 11
g. Xanthine oxidase 저해활성 측정 11
나. 미백 효과 측정 12
a. Tyrosinase 저해활성 측정 12
다. 주름개선 효과 측정 12
a. Elastase 저해활성 측정 12
b. Collagenase 저해활성 측정 13
c. Procollagen type-1 생합성 kit 측정 13
d. Matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) 저해활성 kit 측정 14
라. 세포 독성 측정 14
a. 세포 배양 14
b. MTT assay에 의한 세포 독성 측정 14
마. Western blot을 통한 단백질의 발현 측정 15
바. PCR을 통한 mRNA의 발현 측정 16
a. Total RNA 분리 및 cDNA 합성 16
b. Reverse transcription-polymerase chain reaction 17
c. Real-time PCR 17
Ⅲ. 결과 및 고찰 20
1. 노간주나무 추출물의 항산화 측정 결과 20
가. 총 폴리페놀 함량 확인 21
나. 총 플라보노이드 함량 확인 23
다. 전자공여능 확인 25
라. ABTS 확인 28
마. Ferric-reducing antioxidant power (FRAP) 측정 30
바. Superoxide dismutase (SOD) 유사활성 측정 32
사. Xanthine oxidase 저해활성 측정 35
2. 노간주나무 추출물의 미백 효과 측정 결과 38
가. Mushroom 유래의 tyrosinase 저해활성 확인 38
나. Melanoma cell (B16F10)의 생존율 확인 41
다. 멜라닌 합성에 관여하는 tyrosinase, MITF, TRP-1, TRP
-2의 단백질 발현 및 mRNA 발현 억제 효과 44
라. Real-time PCR 검증 54
3. 노간주나무 추출물의 주름개선 효과 측정 결과 59
가. Elastase 저해활성 확인 59
나. Collagenase 저해활성 확인 62
다. Fibroblast cell (CCD-986sk)의 생존율 확인 65
라. Fibroblast cell (CCD-986sk)에서의 Pro-collagen type-1 생합성 kit 측정 67
마. MMP-1 저해활성 kit 측정 70
바. MMP-1 단백질 및 mRNA 발현 억제 효과 72
Ⅳ. 참고문헌 75
초록 96
Abstract 99

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