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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

김창수 (안동대학교, 안동대학교 대학원)

지도교수
권기석
발행연도
2013
저작권
안동대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

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온실가루이는 전 세계의 온대지역에 서식하는 것으로 알려져 있으며, 과일, 채소 등의 주요한 해충이며 유리하우스 또는 원예시설에서 빈번히 발견된다. 온실가루이의 방제를 위하여 곰팡이를 이용하는 생물농약은, 다양한 곤충병원성 곰팡이로부터 분리된다. 그 중에서도 가장 많이 연구되어진 곤충병원성 곰팡이는 Beauveria bassiana이다. 본 연구의 목적은 곤충병원성 곰팡이 M130을 이용하여 온실가루이를 방제하는 것이며, M130은 이병체로부터 분리된 후 여러 균주 중에서 최종적으로 선발되었다. 형태학적인 특징과 18S rDNA sequencing 결과, M130은 계통발생 분류학적으로 Beauveria bassiana로 최종동정되었다.
Beauveria bassiana M130은 곤충의 표피침입에 있어서 중요한 역할을 하는 chitinase (2523.8 ?M)와 protease (280.86 ?M)의 높은 활성을 보였다. Beauveria bassiana M130을 배양하는 최적배지로서 Extracted Rice Bean medium (ERBM)을 선발하였다. ERBM은 효소 활성의 증가와 Beauveria bassiana M130을 대량배양하기 위한 목적으로 선발하였다.
ERBM에서 배양된 Beauveria bassiana M130은 PDB 배지에서 배양되었을 때보다 더욱 높은 효소활성 (chitinase 4296.333 ?M, protease 326.42 ?M)과 높은 포자농도 (2.5 x 108 spores/㎖)를 유도하였다. ERBM에서 배양된 배양액을 고체배지에 접종액으로 사용하였을 경우, PDB 배지에서 배양된 배양액을 접종액으로 사용하였을 경우보다 약 100배 이상의 분생포자가 생성되었다. 배양된 배양액을 이용한 고체배지에서 분생포자를 회수하여 생물검정(Pot test, field test) 한 결과, Pot test에서는 3회 반복 처리시 최대 84.6 %의 방제가를 나타냈으며, Field test에서는 3회 반복 처리시 최대 45.3 %의 방제가를 보였다. 본 연구의 결과는 온실가루이 방제를 위한 화학살충제를 대체할 수 있는 미생물자원을 이용한 생물소재로서의 기초적인 연구자료로서 이용할 수 있다고 사료되어진다.

목차

Ⅰ. Introduction 1
Ⅱ. Materials and Methods 5
1. Isolation and selection 5
2. Preparation of colloidal chitin 6
3. Dry cell weight 6
4. Measurement of enzyme activity 7
5. Optimization of culture temperature 10
6. Prepare of Extracted Rice Bran Medium 10
7. Optimization of Extracted Rice Bran Medium 11
8. Preparation of Beauveria bassiana M130 conidium 12
9. Preparation of solid state medium (SSM) and collection Beauveria bassiana conidium on SSM 13
10. Incubating of Greenhouse whitefly 14
11. Greenhouse whitefly by against pot test 14
12. Greenhouse whitefly by against field test 15
13. Scanning electron microscopy (SEM) 15
14. Extraction and HPLC analysis 16
Ⅲ. Results and Discussion 17
1. Isolation and selection 17
2. Optimization of culture temperature of Beauveria bassiana M130 22
3. Optimization of Extracted Rice Bran Medium (ERBM) 24
4. Effect of the inoculum concentration on the solid medium 29
5. Bioassay 30
6. Insecticidal process of Beauveria bassiana M130 32
7. Beauvericin determination 33
Ⅳ. References 35
Ⅴ. Korean abstract 42

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