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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 발행연도
- 2013
- 저작권
- 원광대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수2
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본 연구는 저산소증으로 인한 C6 신경교세포의 세포사에서 抑肝散 추출물에 의한 세포 보호 효과 및 기전을 究明하기 위하여 설계되었다. 저산소증은 세포나 조직 내 산소 농도가 무산소증과 정상 수준 사이에 있는 대사 상태로, 세포 내 활성산소종이 증가해 다양한 신호전달 과정을 활성화시켜 세포 사멸을 초래하는 것으로 알려져 있다. 본 실험에서는 저산소증을 유도하기 위하여 cobalt chloride (CoCl2)를 사용하였으며, 抑肝散을 추출하는 탕전방법에 차이를 두어 抑肝散 A와 抑肝散 B로 구분하여 실험을 시행하였다. CoCl2를 C6 신경교세포에 처리한 결과, C6 신경교세포의 세포생존율이 감소하는 것을 확인할 수 있었고, 이는 抑肝散 A와 B를 처리한 군에서 유의하게 억제되어, 抑肝散 A와 B 모두에서 세포 보호 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 抑肝散 A와 B 모두 농도 의존적으로 세포 보호 효과를 나타냈으며, 抑肝散 A 처리군에서 경미하게 더 높은 세포 생존율을 보였으나 유의한 차이는 없었다. 抑肝散은 C6 신경교세포에서 CoCl2에 의해 유발된 활성산소종 (ROS)의 현저한 증가를 억제하였고, 활성산소종을 제거하는 기능이 있는 것으로 알려진 N-acetyl cysteine (NAC) 및 glutathione (GSH) 처리군과 비슷한 세포 보호 효과를 나타냈다. 한편, CoCl2로 유도된 저산소증은 lactate dehydrogenase (LDH)의 방출을 야기하여 세포 사멸에 이르는 것으로 알려져 있어, 抑肝散을 처리한 후 LDH 방출량을 관찰한 결과, CoCl2에 의해 늘어난 LDH 방출이 抑肝散 처리에 의해 억제되는 것을 확인하였다. 또한 抑肝散은 전형적인 세포 사멸 인자인 caspase-3와 PARP 단백질 활성을 억제하고, 저산소증으로 인한 세포 사멸의 주요 인자인 HIF-1α 및 p53 단백질의 발현을 억제하였다.
이상의 결과들을 보면, 抑肝散은 CoCl2로 유도된 저산소증으로 인한 C6 신경교세포의 사멸에 있어 세포 보호 효과를 나타내었고, C6 신경교세포 사멸 과정에서 활성화되는 다양한 물질들을 조절하였다. 이러한 抑肝散의 세포 보호 효과는 뇌졸중 및 다양한 퇴행성 뇌질환을 치료하는 데 유용하게 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
이상의 결과들을 보면, 抑肝散은 CoCl2로 유도된 저산소증으로 인한 C6 신경교세포의 사멸에 있어 세포 보호 효과를 나타내었고, C6 신경교세포 사멸 과정에서 활성화되는 다양한 물질들을 조절하였다. 이러한 抑肝散의 세포 보호 효과는 뇌졸중 및 다양한 퇴행성 뇌질환을 치료하는 데 유용하게 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
목차
Ⅰ. 緖論 1Ⅱ. 實驗材料 및 方法 21. 재료 2가. 약재 2나. 시약 및 기기 3다. 세포주 32. 방법 3가. 시료제조 3나. 세포배양 4다. 세포생존율 측정 4라. LDH 방출 분석 5마. 활성산소종 측정 5바. Western Blot 분석 5사. Caspase-3 activity 분석 6아. 통계 처리 6III. 實驗結果 71. 抑肝散 A와 B의 농도에 따른 C6 신경교세포의 세포생존율 변화 72. CoCl2 농도에 따른 C6 신경교세포의 세포생존율 변화 93. 抑肝散이 CoCl2로 유도된 C6 신경교세포의 사멸에 미치는 영향 114. 抑肝散이 CoCl2로 유도된 C6 신경교세포에서 활성산소종의 생성에 미치는 영향 145. CoCl2로 유도된 C6 신경교세포 사멸에 대한 抑肝散과 항산화제의 보호 효과 166. 抑肝散이 CoCl2로 유도된 LDH 방출에 미치는 영향 187. 抑肝散이 CoCl2로 유도된 C6 신경교세포에서 HIF-1α 및 p53 단백질 발현에 미치는 영향 208. 抑肝散이 CoCl2로 유도된 C6 신경교세포에서 caspase-3 및 PARP 단백질 발현에 미치는 영향 23IV. 考察 27Ⅴ. 結論 33參考文獻 34
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