삼황사심탕의 항산화능 평가 및 모발성장 촉진 효과 :The Antioxidative Evaluation and Hair Growth Effect of Samhwang-Sasimtang

김민지

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자료유형: 학위논문

저자정보: 김민지 (계명대학교, 계명대학교 일반대학원)

지도교수: 김배환

발행연도: 2013

저작권: 계명대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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이 논문의 연구 히스토리 (3)

2014

삼황사심탕의 항산화능 및 C57BL/6 마우스 모델에서의 발모 촉진효과

김민지 , 박교현 , 이인철 외 1명 동의생리병리학회지 2014.04 학술저널

삼황사심탕의 항산화능 및 C57BL/6 마우스 모델에서의 발모 촉진효과

김민지 , 박교현 , 이인철 외 1명 동의생리병리학회지 2014.01 학술저널

2013

삼황사심탕의 항산화능 평가 및 모발성장 촉진 효과

김민지 공중보건 2013.01 학위논문

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본 연구는 천연물질 소재인 삼황사심탕(Samhwang-Sasimtang)을 이용하여 항산화능 평가 및 육모효과를 평가하고, 피부적용 시 요구되는 안전성 평가를 실시함으로서 모발성장 인자로서 가능성을 조사하였다.
삼황사심탕의 에탄올추출물을 이용한 항산화능 평가시험에서, 총 폴리페놀 함량을 먼저 알아보았고 DPPH의 전자공여능, free radical 소거능, SOD유사활성도를 측정하였다.
본 연구의 측정 결과 총 폴리페놀 함량은 28.44mg/g로 측정하였고, 전자공여능은 농도에 따라 증가하고, 전자소거능은 농도 의존적으로 증가하면서 250ppm부터 일정하게 유지되었으며, SOD유사 활성도 측정은 250까지 증가하는 양상을 보였지만 그 이후 농도에서 기대이상의 증가가 관찰되지 않았다.
모발성장 촉진효과를 측정하기 위해서 생후 7주령 된 수컷 C57BL/6 마우스등을 제모한 후 시험물질을 올리브 오일 에 녹여 1일 1회 주 5회 4주간 150㎕씩경피 도포하였다.
실험동물은 대조군(Saline), 양성대조군(3%Minoxidil), 실험군1 (Samhwang-Sasimtang 1%), 실험군2(Samhwang-Sasimtang 2%) 등 4개군으로 분류하여 실험 2주, 4주째 모든 군의 5마리씩 부검하여 육안적 관찰결과 양성대조군> 실험군2> 실험군1> 대조군 순으로 모발성장 효과를 보였다.
체중변동 및 일일 체중증가량에 있어서 양성대조군이 대조군에 비해 다소 높은 수치를 보였으나 유의성은 없었고, 사료 효율에 있어서 양성대조군이 대조군에 비하여 유의성 있는 증가를 나타내었다.
장기무게측정 결과 비장의 무게에 있어 양성대조군의 절대 무게가 대조군과 실험군에 비해 유의하게 높게 나타내었다.
제모한 등 부위 발모상태를 육안으로 관찰한 결과는, 등 부위의 발모상태를 점수화 했을 때 실험 2주째부터 털이 조금씩 자라기 시작하여, 실험 4주째는 양성대조군 80%, 실험군 2에서 60%, 실험군 1에서 40%의 높은 모발성장이 나타났으며 반면 대조군은 다른 군에 비해 미미한 모발성장(20%)를 보여 주었다.
조직학적 관찰결과 모낭의 수, 깊이는 양성대조군> 실험군2> 실험군1> 대조군 순으로 유의적으로 증가하였고, 효소활성도인 ALP와 γ-GT에서는 4주차에서 대조군에 비해 양성대조군> 실험군2> 실험군1 순으로 유의적 증가를 볼 수 있었다. 면역조직학적 관찰결과 모발성장인자인 IGF-1, VEGF는 증가되고, 모발억제인자인 TGF-β1 Caspase-3는 감소되어 모발성장효과를 보였다. 안전성 평가 항목인 피부일차 자극시험, 안점막 자극시험, 피부 감작성시험에서는 모두 자극이 관찰되지 않았다.
본 실험의 결과를 종합해 볼 때, 삼황사심탕은 안전성이 좋고 모발성장 촉진 효과가 우수한 탈모억제개선 천연물질 소재로서 실용가능성이 있음을 확인할 수 있었다.

The purpose of this study is to evaluate the antioxidant activity, hair growth effects and safety of a natural herbal extract, Samhwang-Sasimtang.
To evaluate the antioxidant ability of Samhwang-Sasimtang ethanol extract, the total content of phenolic compounds, electron donating ability, free radical scavenging activity, and SOD-like activities were determined using several systems.
The total content of the phenolic compounds of Samhwang-Sasimtang extract was 28.44mg/g. The extract showed strong electron donating ability and free radical scavenging activity in a concentration-dependent manner. SOD-like activity also rose through increasing the concentrations of Samhwang-Sasimtang.
In order to estimate the hair growth effects of Samhwang-Sasimtang extract, it was applied to the back of seven-week-old C57BL/6 male mice at an amount of 150㎕ a day, five days a week, for four weeks in total. Experimental animals were classified into four groups - control group (C, saline), positive control group (PC, minoxidil 3%), experimental group 1 (E1, Samhwang-Sasimtang 1%), and experimental group 2 (E2, Samhwang-Sasimtang 2%). Ten mice were assigned to each group and five mice in each group were sacrificed at weeks 2 and 4, respectively. There was no a significant difference in body weight change the among experimental groups. The PC group showed a significant increase in feeding efficiency ratio compared with the control group.
The relative organ weights of the spleen and thymus in the PC group showed a significant increase compared with the other groups.
In macroscopic observation of hair growth at week 4, the scores of hair growth on the backs of mice were 80% in the PC group, 60% in the E2 group, 40% in the E1 group, and only 20% in the control group.
In terms of histological observation, the ratio and thickness of hair follicles in each group were significantly high in this order: PC, E2, E1, and the control group. The enzyme activities of ALP and γ-GT also increased significantly in the PC, E2, and E1 in this order groups when compared with the control group at week 4. In the case of immunohistological examination, the hair growth factors, IGF-1 and VEGF, were increased in PC, E1 and E2 groups compared with the control group. Meanwhile, hair growth inhibition factors, TGF-β1 and Caspase-3, were reduced in PC, E1 and E2 groups compared with the control group. After conducting primary skin irritation, eye irritation, and skin sensitization tests, it was found that Samhwang-sasimtang extract causes no irritation.
These results indicate that Samhwang-Sasimtang extract may be effective in promoting hair growth without side effects, and suggest that it can be used practically as a superior natural agent for hair growth promotion.

#Samhwang-Sasimtang #Hair Growth Effect #Antioxidative Evaluation

1. 서론 1
2. 재료 및 방법 6
2.1 시약 및 기기 6
2.2 시료 제작 6
2.3 In vitro 항산화능 실험 7
2.3.1 총 페놀 함량 7
2.3.2 DPPH의 전자공여능 7
2.3.3 Free radical 소거능 8
2.3.4 Superoxide dismutase(SOD) 유사활성 측정 8
2.4 In vivo 육모효과 실험 9
2.4.1 실험동물 및 처치 9
2.4.2 시료조제 및 도포 9
2.4.3 음수량, 사료량, 체중 및 사료효율 측정 9
2.4.4 장기 무게 측정 10
2.4.5 육안적 관찰 10
2.4.6 털 길이 및 털 무게 10
2.4.7 조직학적 관찰 10
2.4.8 피부조직의 효소활성도 측정 11
2.4.8.1 Alkaline phosphatase(ALP) 11
2.4.8.2 γ-Glutamyl transpeptidase(γ-GT) 11
2.4.9 피부조직의 면역조직학적 관찰 11
2.5 안전성 평가 12
2.5.1 KeraskinTM을 이용한 피부일차 자극 평가 12
2.5.2 인공각막을 이용한 안점막 자극시험 평가 12
2.5.3 LLNA법을 이용한 피부 감작성 평가 13
2.6 통계처리 14
3. 연구결과 15
3.1 In vitro 항산화능 실험 15
3.1.1 총 페놀 함량 15
3.1.2 DPPH의 전자공여능 16
3.1.3 Free radical 소거능 17
3.1.4 Superoxide dismutase(SOD) 유사활성 18
3.2 In vivo 육모효과 실험 19
3.2.1 음수량, 사료량, 체중 변동 및 사료효율 측정 19
3.2.2 장기 무게 변동 21
3.2.3 육안적 변화 22
3.2.4 털 길이 및 털 무게 23
3.2.5 조직학적 변화 24
3.2.6 피부조직의 효소활성도 변동 28
3.2.6.1 Alkaline phosphatase(ALP) 28
3.2.6.2 γ-Glutamyl transpeptidase(γ-GT) 30
3.2.7 피부조직의 면역조직학적 변화 32
3.3 안전성 평가 결과 33
3.3.1 KeraskinTM을 이용한 피부일차 자극 평가 33
3.3.2 인공각막을 이용한 안점막 자극시험 평가 35
3.3.3 LLNA법을 이용한 피부 감작성 평가 37
4. 고찰 39
참고문헌 45
부 록 51
영문초록 56
국문초록 59

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