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논문 기본 정보

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학위논문
저자정보

김희영 (부산대학교, 부산대학교 대학원)

발행연도
2013
저작권
부산대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수7

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

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We made a comparative study of kimchis prepared with different ingredients. Cancer preventive kimchi (CPK) and anticancer kimchi (ACK) were already developed by enhancing the chemopreventive activities proved by various experiments in our laboratory. Kimchis were fermented for 4 weeks at 5℃, and tested pH, texture, microbial count, sensory evaluation, identifying bioactive flavonoides using LC-MS, DPPH radical-scavenging activity MTT assay and RT-PCR using HT-29 human colon carcinoma cells. During 5 weeks of fermentation, CPK and ACK showed higher pH and lower acidity than standardized kimchi (SK). ACK showed lower rate of total aerobic bacterial count than SK and CPK, while the counts of lactic acid bacteria were similar in SK, CPK and ACK. In sensory evaluation test, SK received the highest overall acceptability score; followed by CPK and ACK as the same score. CPK and ACK contained some bioactive flavonoids, especially isoramnetin-3-O-glucoside and isorhamnetin were identified in ACK. In DPPH assay, ACK showed 88% of antioxidation, and 86% CPK, 73% SK and 59% commercial kimchi (CK) in the order (p<0.05). In MTT assay on HT-29 human colon carcinoma cells, ACK showed 83% of in vitro anticancer effect, however, CPK exhibited 82%, SK 77% and CK 68%. ACK also significantly reduced mRNA expressions of iNOS, COX-2 and Bcl-2 in the HT-29 human colon carcinoma cells (p<0.05). In addition, Bax, p21 and p53 expressions of ACK treatment significantly increased compared to the other groups(p<0.05).
We evaluated the preventive effect of kimchis prepared with different ingredients on azoxymethane(AOM) / dextran sulfate sodium(DSS) induced colitis-associated colon cancer(CAC). Mice (Balb/c, male) were first given single intraperitoneal injection of AOM (10 mg/kg). Starting 2 and 5 weeks after the injection, mice received 2% of DSS in the drinking water for 7 days. After injection of 2 weeks, methanolic extracts from CK, SK, CPK and ACK were orally administrated for the next 4 weeks. High dose of ACK significantly decreased the ratio of colon weight/length (36.18±5.92 mg/cm), and showed the least tumor numbers (14.1±2.8) than other groups (p<0.05). Histological observation suggested that ACK suppressed mucosal damages. In pro-inflammatory cytokines(IL-6, TNF-α, IL-12, IL-17A and IFN-γ) levels in serum and colon tissue, all kimchi treated groups decreased the expressions significantly(p<0.05). Especially, the margins of the reduction in high dose of ACK expressions were the highest. ACK also significantly reduced mRNA and protein expressions of iNOS and COX-2 in the colon tissue (p<0.05). In addition, p21 and p53 expressions of ACK treatment significantly increased compared to the other groups(p<0.05). Those results suggest that kimchi has a preventive effect on AOM/DSS-induced CAC in Balb/c mice, especially anti-cancer kimchi possibly be used as a health functional food to prevent colon cancer.

목차

Ⅰ. 서 론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 3
1. 재료를 달리한 배추김치의 이화학적 특성 및 기능성 측정 3
1) 시료준비 3
(1) 배추 3
(2) 절임배추 3
(3) 김치 재료 4
(4) 김치의 제조 4
(5) 메탄올 추출물의 제조 4
2) 이화학적 특성 측정 및 관능평가 8
(1) pH 및 산도 측정 8
(2) 염도 측정 8
(3) 총균수 및 총유산균수 측정 8
(4) 관능평가 9
3) In vitro 항산화 기능성 측정 9
(1) DPPH 라디칼 소거 효과 9
4) In vitro 항암 효과 측정 10
(1) 암세포 배양 10
(2) MTT assay 11
(3) Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) 13
(4) LC-MS를 이용한 플라보노이드 분석 15
2. 재료를 달리한 배추김치의 AOM/DSS로 유도된 Balb/c 마우스에서의 대장암 억제 효과 17
1) 시료준비 17
2) AOM/DSS로 유도된 Balb/c 마우스에서의 대장암 억제 효과 17
(1) 실험동물 17
(2) 동물실험모델 18
(3) 사망 및 임상증상관찰 20
(4) 체중 측정 20
(5) 대장 길이 및 장기 무게 측정 20
(6) 대장 조직의 병리학적 검사 20
(7) Serum pro-inflammatory cytokines 측정 21
(8) Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) 21
(9) Western blot 22
3. 통계분석 24
Ⅲ. 결과 및 고찰 25
1. 재료를 달리하여 제조한 배추김치의 이화학적 특성 비교 25
1) 이화학적 특성 비교 25
(1) pH 및 산도 변화 25
(2) 염도의 변화 28
(3) 총균수 및 유산균수의 변화 29
(4) 관능평가 33
2) In vitro 항산화 및 항암 기능성 비교 36
(1) DPPH 라디칼 소거효과 36
(2) HT-29 human colon carcinoma cells 에서의 in vitro 항암 효과 36
가. 암세포 성장 저해 효과 38
나. iNOS 와 COX-2 의 mRNA 발현 41
다. Bcl-2 와 Bax 의 mRNA 발현 44
라. p53 와 p21 의 mRNA 발현 47
(3) 플라보노이드 물질 분석 50
2. 재료를 달리하여 제조한 배추김치의 AOM/DSS로 유도된 Balb/c 마우스에서의 대장암 억제 효과 53
1) 사망률 및 임상증상 53
2) 체중 53
3) 장기 무게 53
4) 대장 길이 및 대장 무게/길이 비율 57
5) 대장 조직 내 종양 개수 58
6) 대장 조직의 병리학적 관찰 64
7) Serum pro-inflammatory cytokines 67
8) 대장 조직의 mRNA 및 단백질 발현 71
(1) Pro-inflammatory cytokines 의 mRNA 발현 71
(2) iNOS 와 COX-2 의 mRNA 및 단백질 발현 74
(3) p21 과 p53 의 mRNA 및 단백질 발현 78
Ⅳ. 요약 및 결론 82
참고문헌 85
Abstract 97

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