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논문 기본 정보

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학위논문
저자정보

강성우 (성균관대학교, 성균관대학교 일반대학원)

지도교수
이두성
발행연도
2013
저작권
성균관대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수5

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

초록· 키워드

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pH민감성 양친성 고분자로 이루어진 나노입자는 약산성을 가지는 암 및 류마티스관절염 질환부위에 약물을 선택적으로 전달할 수 있어 많은 연구가 진행되고 있다. 본 논문에서는 poly(β-aminoster) (PAE) 기반 그라프트 공중체들을 합성하고, pH 변화에 따라 선택적으로 약물방출이 가능한 Micelle과 Polymersome을 제조하여 약물봉입 및 pH에 따른 약물방출거동에 대해 연구하였다. Chapter 1에서는 pH민감도가 조절된 poly(β-amino ester)-g-poly(ethylene glycol) (PAE-g-PEG)을 제조한 후 암 및 류마티스관절염부에 선택적으로 약물을 방출하기위해 상기 질환치료제인 methotrexate(MTX)를 봉입하고 약물방출거동을 확인하였다. 먼저, pH민감도 조절 및 고분자 Micelle의 안정도를 높여주기 위해 pH 민감성 PAE의 Pendent group으로 Hyroxyl기와 Methyl기의 비율이 서로 다른 두 가지 PAE를 합성한 후 친수성부분으로 Poly(ethylene glycol)를 PAE에 컨쥬게이한 두 가지 PAE-g-PEG 를 제조하였다. 최종 제조된 고분자의 pH 민감도를 확인한 결과 Hydroxyl기와 Methyl기가 같은 비율로 존재하는 공중합체의 경우 Hydroxyl기만 존재하는 공중합체에 비해 좀더 낮은 pH에서 마이셀?디마이셀 전이됨을 확인할 수 있었으며, 임계입자형성농도(CAC)를 측정한 결과 Hydroxyl기만 존재하는 공중합체에 비해 낮은 값을 보임에 따라 Methyl기의 도입에 따라 마이셀코어가 안정됨을 확인하였다. 또한, 제조된 고분자의 세포독성시험결과 생체적합함을 알 수 있었다. 그리고, 소수성인 MTX와 제조된 pH민감성 공중합체를 Film Rehydration방법으로 탈염수를 가지고 봉입한 결과 pH변화에 따른 서로 다른 방출경향을 확인할 수 없었으며, pH 7.4와 5.8 조건 모두 3시간이내에 약 50 %이상의 약물을 방출하는 것으로 보아 본 연구에서 제시된 방법으로는 MTX를 봉입할 수 없음을 확인할 수 있었다. Chapter 2에서는 새로운 pH민감성 폴리머좀을 개발하고, 친수항암제로 Doxorubicin Hydrochloride(DOX)을 봉입 후 약물방출거동에 대해 살펴보았다. 일반적으로 소수성막과 수용액을 내포하는 코어를 가진 폴리머좀은 소수성물질 및 친수성물질을 동시에 봉입할 수 있는 장점을 가지고 있다. 하지만, 기존의 pH민감성 폴리머좀은 생분해성이 없거나 폴리머좀제조 시 유기용매사용, 그리고 원하는 pH영역에서 빠른 방출을 보이지 못하는 등 각각 제한점이 있었다. 따라서, 본 연구에서는 이러한 문제점을 해결하기위해 생분해성이 있으며, pH의 조절만으로 폴리머좀을 제조할 수 있고, pH의 변화에 따라 빠르게 담지된 물질을 방출할 수 있는 새로운 pH민감성 폴리머좀구조체 합성에 목표를 두었다. 이러한 특성의 폴리머좀을 제조하기위해, 먼저 Hydroxyl Group이 도입된 PAE를 제조한 후 양친성의 Poly(ethylene glycol)-b-Poly(ε-carprolactone)을 Conjugation한 Poly(ethylene glycol)-b-Poly(ε-carprolactone)-grafted Poly(β-amino ester)를 합성하였다. DLS, TEM 및 Cryo-TEM으로 분석한 결과, 합성된 고분자는 pH의 조절만으로 생리학적 pH(7.4)에서는 Vesicle구조를 이루었으며 pH 7이하에서는 Unimer상태 (고분자의용해)를 나타내었다. 친수성물질의 수송체로써의 응용가능성을 확인하기위해 DOX을 봉입하여 방출경향을 살펴본 결과, pH에 따른 Vesicle/Unimer 전이를 통해 봉입된 물질은 pH 7.4에 비해 낮은 pH(6.4)에서 급격한 방출을 보임을 in vitro 방출실험 및 세포실험 통해 입증하였다. 그리고, 2일간 수용액상에서(pH 7.4, PBS)에서 고분자의 분해거동을 살펴본 결과 2일 후 약 30%가 분해됨을 확인하였고, 세포독성시험을 통해 제조된 폴리머좀의 높은 생체적합성을 확인할 수 있었다.

목차

Overview 1
Chapter 1. Synthesis and characterization of pH-sensitive poly(β-amino ester)-g-poly(ethylene glycol) micelles and investigation of its methotrexate encapsulation 4
1.1 Introduction 4
1.2 Experimental 8
1.2.1 Materials 8
1.2.2 Synthesis 9
1.2.2.1 Synthesis of carboxylic acid-modified mPEG (PEG-COOH) 9
1.2.2.2 Synthesis of PAEs 9
1.2.2.3 Synthesis of PEG-grafted PAEs (HPAE-g-PEG and MPAE-g-PEG ) 11
1.2.3 Characterizations of polymers 12
1.2.4 Characterizations of polymeric particles 13
1.2.4.1 Fluorescence measurement 13
1.2.4.2 Dynamic light scattering measurement 13
1.2.5 In vitro cytotoxicity of copolymer 14
1.2.6 Drug loading and in vitro drug release 15
1.3 Results and Dissussion 16
1.3.1 Synthesis and characterization of copolymers 16
1.3.2 pH-Sensitive properties of synthesized copolymers 19
1.3.3 In vitro cytotoxicity of copolymer 24
1.3.4 Drug loading and in vitro release 25
1.4 Conslusion 26
Chapter 2. pH-Triggered unimer/vesicle-transformable and biodegradable polymersomes based on PEG-b-PCL?grafted poly(β-amino ester) for anti-cancer drug delivery 31
2.1 Introduction 31
2.2 Experimental 34
2.2.1 Materials 34
2.2.2 Synthesis 35
2.2.2.1 Synthesis of PEG-PCL. 35
2.2.2.2 Synthesis of carboxylic acid-modified mPEG (PEG-COOH) and PEG-PCL (PEG-PCL-COOH) 35
2.2.2.4 Synthesis of PEG- and PEG-PCL-grafted PAE (PAE-g-PEG and PAE-g-PCL-PEG) 36
2.2.3 Characterizations of polymers 38
2.2.4 Preparation of polymeric particles 38
2.2.5 Characterizations of polymeric particles 39
2.2.6 Drug loading and in vitro drug release using PAE-g-PCL(1k)-PEG(2k) copolymer 40
2.2.7 Cellular uptake. 41
2.2.8 In vitro degradation 41
2.2.9 In vitro cytotoxicity of copolymer 42
2.3 Results and Discussion 43
2.3.1 Synthesis and characterization. 43
2.3.2 Aggregation behavior of copolymers and characterization of polymeric particles 46
2.3.3 Drug loading and in vitro drug release behaviour 50
2.3.4 In vitro degradation behavior and cytotoxicity of copolymer 52
2.4 Conclusions 54
Abstract 58

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