개인구독
소속 기관이 없으신 경우, 개인 정기구독을 하시면 저렴하게
논문을 무제한 열람 이용할 수 있어요.
지원사업
학술연구/단체지원/교육 등 연구자 활동을 지속하도록 DBpia가 지원하고 있어요.
커뮤니티
연구자들이 자신의 연구와 전문성을 널리 알리고, 새로운 협력의 기회를 만들 수 있는 네트워킹 공간이에요.
초록· 키워드
오류제보하기
단백질의 특정 위치에 비천연아미노산을 삽입함으로써 변형된 단백질의 기능을 다양한 분야에서 활용할 수 있다. 이 연구는 대장균에서 효모균 타이로신-tRNA 합성효소(Sc TyrRS)와 변형된 대장균 시작 tRNA (fMamtRNA<SUB>CUA</SUB>)의 이종 쌍을 사용하여 p-아지도페닐알라닌(AzPhe)을 단백질에 유전적으로 삽입하는 방법을 개발하는데 있다. 우리는 Methanocaldococcus jannaschii (Mj) TyrRS와 Sc TyrRS의 구조적 유사성과 Mj TyrRS를 돌연변이 시켜 유래된 AzPhe-tRNA 합성효소와의 유사성을 가정하여 세 가지 다른 Sc TyrRS 변이체를 만들었다. 세 가지 변이체는 AzPheRS-1, -2 및 -3으로 명명되었으며, 이들의 AzPhe 삽입 능력을 엠버서프레션에 의해 나타나는 클로람페니콜 항생제 저항성과 β-갈락토시다제 활성을 측정하여 평가하였다. 이 변이체를 가진 대장균은 AzPhe 존재시 2~3배 높은 항생제 저항성과 β-갈락토시다제 활성을 보였다. 또한 정제된 재조합 아미노아실-tRNA 합성효소(aaRS) 단백질을 사용한 in vitro 아미노아실화 실험에서 세 가지 AzPheRS 변이체는 Sc TyrRS와 비교하여 AzPhe에 대한 아미노아실화 활성이 향상되었으며, 티로신의 촉매 효율성(k<SUB>cat</SUB>/K<SUB>m</SUB>)은 대략 10배 낮아졌다. 대장균에서 세 가지 변이체 모두 AzPhe를 리포터 단백질 GFP<SUB>(TAG)</SUB>에 성공적으로 삽입하였으며, AzPheRS-2 및 AzPheRS-3이 AzPheRS-1보다 높은 효율을 나타냈다. 이러한 결과는 Sc TyrRS 및 fMamtRNA<SUB>CUA</SUB>의 이종 쌍이 대장균에서 유전적 코드를 확장하여 비천연 아미노산을 단백질의 특정 위치에 삽입할 수 있는 추가적인 플랫폼이 될 수 있음을 보여주며, 새로운 기능을 가진 단백질을 생성하는 데 도움이 될 수 있다.
목차
Materials and Methods
Results
Discussion
적요
References
참고문헌 (19)
참고문헌 신청
Cestari I and Stuart K. 2012. A spectrophotometric assay for quantitative measurement of aminoacyl-tRNA synthetase activity. J. Biomol. Screen. 18, 490–497.
Chin JW. 2017. Expanding and reprogramming the genetic code. Nature 550, 53–60.
Chin JW, Martin AB, King DS, Wang L, and Schultz PG. 2002a. Addition of a photocrosslinking amino acid to the genetic code of Escherichia coli. Proc. Natl Acad. Sci. USA 99, 11020–11024.
Chin JW, Santoro SW, Martin AB, King DS, Wang L, and Schultz PG. 2002b. Addition of p-azido-L-phenylalanine to the genetic code of Escherichia coli. J. Am. Chem. Soc. 124, 9026–9027.
Chow CM and RajBhandary UL. 1993. Saccharomyces cerevisiae cytoplasmic tyrosyl-tRNA synthetase gene. J. Biol. Chem. 268, 12855–12863.
Chin JW. 2017. Expanding and reprogramming the genetic code. Nature 550, 53–60.
Chin JW, Martin AB, King DS, Wang L, and Schultz PG. 2002a. Addition of a photocrosslinking amino acid to the genetic code of Escherichia coli. Proc. Natl Acad. Sci. USA 99, 11020–11024.
Chin JW, Santoro SW, Martin AB, King DS, Wang L, and Schultz PG. 2002b. Addition of p-azido-L-phenylalanine to the genetic code of Escherichia coli. J. Am. Chem. Soc. 124, 9026–9027.
Chow CM and RajBhandary UL. 1993. Saccharomyces cerevisiae cytoplasmic tyrosyl-tRNA synthetase gene. J. Biol. Chem. 268, 12855–12863.
이 논문과 함께 이용한 논문
[BIOLOGY] 오랫동안 젊음을 유지 해주는 획기적인 노화 방지 세포가 발견되다.
편집부
BBC 사이언스
2024
.04
Biological and Molecular Characterization of a Korean Isolate of Orthotospovirus chrysanthinecrocaulis (Formerly Chrysanthemum Stem Necrosis Virus) Isolated from Chrysanthemum morifolium
Seong Hyeon Yoon
,
Su Bin Lee
,
Eseul Baek
외 2명
Research in Plant Disease(식물병연구)
2023
.09
해양 미생물을 활용한 생명과학 및 생명공학 기술 개발
윤용준
,
윤보현
,
황성민
외 1명
생명과학회지
2023
.07
효모에서 텔로미어 재조합을 관찰하기 위한 새로운 유전학적 연구방법의 개발
김민규
,
배성호
미생물학회지
2016
.03
Molecular Characterization and Variation of the Broad bean wilt virus 2 Isolates Based on Analyses of Complete Genome Sequences
Hae-Ryun Kwak
,
Mi-Kyeong Kim
,
Ye-Ji Lee
외 5명
The Plant Pathology Journal
2013
.12
최근 본 자료
댓글(0)
0
UCI(KEPA) : I410-151-24-02-089616940