Botrytis cinerea가 생산하는 phytotoxin이 병원성에 미치는 영향을 조사하던 중에 두 개의 새로운 phytotoxin을 발견하였다. 1994년과 1996년에 여러 식물체로부터 분리한 Botrytis cinerea 균주들을 기주별, 지역별, 형태적 특성별로 25개의 균주를 선별한 후 단포자 분리를 실시하였다. 22균주는 오이, 토마토, 고추 담배, 배추 등 5가지 식물에 대해 강하거나 중간 정도의 병원성을 보였다. 그러나 KJ 균주를 포함한 3균주는 병원성이 매우 약하였다. 식물에 대한 phytotoxicity를 조사하기 위하여 25균주의 배양 여액을 담배잎에 leaf-wounding assay를 실시한 결과 2-16균주가 가장 강한 활성을 보였다. 따라서 2-16 균주의 배양액을 ethyl acetate로 추출한 후 flash silica gel column chromatography, silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, preparative TLC 및 preparative HPLC 등을 통하여 두 개의 phytotoxin을 분리하였다. 분리한 phytotoxin을 질량분석과 핵자기 공명분석을 통해 구조동정을 실시한 결과 3-O-acetyl botcinol과 3-O-acetyl botcinolide로 동정하였다. 두 개의 물질은 leaf-wounding bioassay에서 잎에 괴사를 일으켰으며, 또한 담배 잎에서 심각한 전해질 누출을 일으켰다. 두 생물 검정에서 3-O-acetyl botcinol이 3-O-acetyl botcinolide보다 강한 활성을 보였다. B. cinerea가 생산한 두 개의 phytotoxin에 대해서는 본 논문에서 처음으로 보고하는 바이다.
We discovered two novel phytotoxins produced by the pathogenic fungus, Botrytis cinerea. Among the twentyfive B. cinerea isolates, which were obtained from various host plants in 1994 and 1996, twenty-two showed strong or moderate pathogenicity on five plants such as cucumber, tomato, red pepper, tobacco and Chinese cabbage. The culture filtrate of the B. cinerea 2-16 strain showed the most potent phytotoxic activity in a tobacco leaf-wounding assay. Two novel phytotoxins were isolated from the liquid cultures of B. cinerea 2-16 by ethyl acetate extraction, flash silica gel column chromatography, silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, preparative TLC and subsequently preparative HPLC. Their chemical structures were determined to be 3-O-acetyl botcinol and 3-O-acetyl botcinolide, respectively, by mass and NMR spectral analyses. These two phytotoxins caused leaf necrosis in a leaf-wounding bioassay, and significant electrolyte leakage from leaf tissues of tobacco. In the two bioassays tested, 3-O-acetyl botcinol exhibited stronger phytotoxic activity than 3-O-acetyl botcinolide. This is the first report on the production of both 3-O-acetyl botcinol and 3-O-acetyl botcinolide from B. cinerea.