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자료유형
학술저널
저자정보
김범준 (중앙대학교 시스템생명공학과) 김병찬 (중앙대학교) 이호중 (중앙대학교) 이상준 (중앙대학교)
저널정보
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 한국미생물·생명공학회지 제49권 제4호
발행연도
2021.12
수록면
534 - 542 (9page)
DOI
10.48022/mbl.2111.11003

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CRISPR/Cas를 이용한 유전체 편집과 유전자 발현 조절을 위한 기술에서 sgRNA는 표적서열을 인식하는 역할을 한다. gal 프로모터를 표적서열로 하여 유전체 편집에 필요한sgRNA의 표적인식서열의 길이와 유전자 발현 조절에 필요한 sgRNA의 표적인식서열의 길이를 Cas9-NG에서 체계적으로 비교하였다. 유전체 편집의 경우, sgRNA의 표적인식서열을 구성하는 20개의 뉴클레오티드에서 3개의 뉴클레오티드의 결손만을 허용하였다. 하지만, 유전자 발현 조절에는표적인식서열에서 11개의 뉴클레오티드가 결손되어도 표적서열을 인식하고 결합할 수 있다는 것을 밝혔다. 따라서, sgRNA의 표적인식서열에서 4개 이상의 뉴클레오티드의 결손이 있는 경우에 sgRNA/Cas9-NG는 표적 DNA 서열에 특이적으로 결합을 하지만, 엔도뉴클레아제의 활성을 갖지 못하기 때문에 유전체 편집을 할 수 없는 것으로 판단된다. 이결과는 인공전사인자 개발과 합성생물학 분야의 다양한CRISPR 기술 발전에 도움을 줄 것이다.
#CRISPR interference #single-molecular guide RNA #gal promoter #D-galactose

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참고문헌 (18)

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Jansen R / 2002 / Identification of genes that are associated with DNA repeats in prokaryotes / Mol. Microbiol 43:1565~1575 google schola Horvath P / 2010 / CRISPR/Cas, the immune system of bacteria and archaea / Science 327:167~170 google schola 이호중 / 2021 / Advances in Accurate Microbial Genome- Editing CRISPR Technologies / Journal of Microbiology and Biotechnology 31(7):903~911 dbpia Jinek M / 2014 / Structures of Cas9 endonucleases reveal RNA-mediated conformational activation / Science 343:1247997 google schola Jinek M / 2012 / A programmable dual-RNA-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity / Science 337:816~821 google schola

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