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학술저널
저자정보
박동석 (울산대학교) 윤미정 (울산대학교) 권지연 (울산대학교) 장안희 (울산대학교) 김용섭 (울산대학교) 최순철 (울산대학교)
저널정보
한국분자세포생물학회 Molecules and Cells Molecules and Cells 제40권 제11호
발행연도
2017.11
수록면
823 - 827 (5page)

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Genome editing using programmable nucleases such as CRISPR/Cas9 or Cpf1 has emerged as powerful tools for gene knock-out or knock-in in various organisms. While most genetic diseases are caused by point mutations, these genome-editing approaches are inefficient in inducing single-nucleotide substitutions. Recently, Cas9-linked cytidine deaminases, named base editors (BEs), have been shown to convert cytidine to uridine efficiently, leading to targeted single-base pair substitutions in human cells and organisms. Here, we first report on the generation of Xenopus laevis mutants with targeted single-base pair substitutions using this RNA-guided programmable deaminase. Injection of base editor 3 (BE3) ribonucleoprotein targeting the tyrosinase (tyr) gene in early embryos can induce site-specific base conversions with the rates of up to 20.5%, resulting in oculocutaneous albinism phenotypes without off-target mutations. We further test this base-editing system by targeting the tp53 gene with the result that the expected single-base pair substitutions are observed at the target site. Collectively, these data establish that the programmable deaminases are efficient tools for creating targeted point mutations for human disease modeling in Xenopus.
#base editing #CRISPR/Cas9 #genome engineering #Xenopus laevis

목차

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Aslan, Y. / 2017 / Highefficiency non-mosaic CRISPR-mediated knock-in and indel mutation in F0 Xenopus / Development 144:2852~2858 google schola Bae, S. / 2014 / Cas-OFFinder : a fast and versatile algorithm that searches for potential off-target sites of Cas9RNA-guided endonucleases / Bioinformatics 30:1473~1475 google schola Blitz, I. L. / 2013 / Biallelic genome modification in F(0)Xenopus tropicalis embryos using the CRISPR/Cas system / Genesis 51:827~834 google schola Harland, R. M. / 2011 / Xenopus research : metamorphosed by genetics and genomics / Trends Genet 27:507~515 google schola Kim, H. / 2014 / A guide to genome engineering with programmable nucleases / Nat. Rev. Genet 15:321~334 google schola

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