재래산양의 체내 및 체외유래 난자의 활성화 처리방법 및 배양조건이 단위발생란의 체외발달에 미치는 영향

박희성; 김태숙; 이윤희; 정수영; 이명열; 진종인; 박준규; 이지삼; 김충희

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자료유형: 학술저널

저자정보: 박희성 (진주산업 대학교 동물생명과학과ㆍ동물생명산업지역협력연구센터) 김태숙 (진주산업 대학교 동물생명과학과ㆍ동물생명산업지역협력연구센터) 이윤희 (진주산업 대학교 동물생명과학과ㆍ동물생명산업지역협력연구센터) 정수영 (진주산업 대학교 동물생명과학과ㆍ동물생명산업지역협력연구센터) 이명열 (진주산업 대학교 동물생명과학과ㆍ동물생명산업지역협력연구센터) 진종인 (진주산업 대학교 동물생명과학과ㆍ동물생명산업지역협력연구센터) 박준규 (진주산업 대학교 동물생명과학과ㆍ동물생명산업지역협력연구센터) 이지삼 (진주산업 대학교 동물생명과학과ㆍ동물생명산업지역협력연구센터) 김충희 (진주산업 대학교 동물생명과학과ㆍ동물생명산업지역협력연구센터)

저널정보: 한국동물번식학회 한국동물번식학회지 한국동물번식학회지 제28권 제3호

발행연도: 2004.1

수록면: 181 - 185 (5page)

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이 논문의 연구 히스토리 (12)

2004

재래산양에 있어서 핵이식란의 융합조건이 융합 및 체외발달에 미치는 영향

박희성 , 김태숙 , 이윤희 외 6명 Reproductive & Developmental biology 2004.01 학술저널

재래산양의 체내 및 체외유래 난자의 활성화 처리방법 및 배양조건이 단위발생란의 체외발달에 미치는 영향

박희성 , 김태숙 , 이윤희 외 6명 한국동물번식학회지 2004.01 학술저널

재래산양의 과배란처리에 있어서 회수시간이 난자의 회수율에 미치는 영향

박희성 , 정수영 , 김태숙 외 5명 한국수정란이식학회지 2004.01 학술저널

재래산양에 있어서 핵이식란의 융합조건이 융합 및 체외발달에 미치는 영향

박희성 , 김태숙 , 이윤희 외 6명 한국동물번식학회지 2004.01 학술저널

재래산양의 반복 과배란처리에 의한 난자의 회수율과 등급에 관한 연구

박희성 , 이윤희 , 김태숙 외 4명 한국수정란이식학회지 2004.01 학술저널

재래산양의 반복 과배란처리가 난자의 회수율에 미치는 영향

박희성 , 김태숙 , 이윤희 외 4명 한국동물번식학회 학술대회 2004.01 학술대회자료

재래산양에 있어서 핵이식란의 융합조건이 융합 및 체외발달에 미치는 영향

박희성 , 김태숙 , 이윤희 외 6명 한국동물번식학회 학술대회 2004.01 학술대회자료

재래산양의 체내 및 체외유래 난자의 활성화 처리방법이 체외발달에 미치는 영향

박희성 , 김태숙 , 이윤희 외 5명 한국동물번식학회 학술대회 2004.01 학술대회자료

재래산양의 과배란처리에 의한 체내 및 체외성숙유래 난자의 회수시간에 따른 회수율

박희성 , 김태숙 , 이윤희 외 5명 한국동물번식학회 학술대회 2004.01 학술대회자료

2003

재래산양에 있어서 난포란의 활성화 처리방법이 체외발달에 미치는 영향

박희성 , 이명열 , 김현정 외 4명 한국동물번식학회 학술대회 2003.01 학술대회자료

재래산양의 과배란처리에 있어서 회수시간이 난자의 회수율에 미치는 영향

박희성 , 홍승표 , 김선훈 외 4명 한국동물번식학회 학술대회 2003.01 학술대회자료

2000

한국 재래산양의 난포란의 회수와 체외수정에 관한 연구

박희성 , 이지삼 , 정장용 한국수정란이식학회지 2000.01 학술저널

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본 연구는 동물복제 및 형질전환 동물생산 등의 연구에 기초자료를 제공하고자 재래산양의 oocyte를 단위발생을 유도하여 회수난자의 조건, 활성화방법, 배양조건 등이 단위발생란의 체외발달율에 미치는 영향을 조사하여 재래산 양의 최적의 배양조건을 확립하고자 실시하였다. 난자의 회수는 체중 15～25 Kg 전 ㆍ 후의 성숙한 미경산 재래산양에 FSH와 PMSG 를 사용하여 과배란을 유기하여 hCG 투여 후 제 35시간째에 외과적인 방법으로 in vivo (체내성숙) 난자는 난관을 관류하는 방법으로 회수하였고, in vitro (체외성숙) 난자는 난포로부터 흡입하여 난포란을 채취하여 약 22시간 체외성숙을 실시하였다. 활성화 처리는 전기자극법과 Ionomycin + 6-DMAP를 처리하여 단위발생을 유도하였다. 복제수정란의 배양은 M16, TCM-199 및 mSOF 배양액으로 6～7일 동안 체외배양을 실시하였다. 활성화를 유도하기 위하여 전기자극 및 ionomycin + 6-DMAP 처리를 하였을 때 분할율은 각각 64.1 및 76.5%로서 이들간에 차이는 없었다. 배반포기로의 발달율은 전기자극방법으로는 전혀 발달이 이루어지지 않았으나, ionomycin +6-DMAP 처리방법에서는 15.6%가 배반포로 발달하였다. In vivo 난자와 in vitro 난자를 활성화를 유도하였을 때 분할율은 86.8 및 69.0%로서 이들간에 유의적인 차이는 없었다. 4-세포기(93.9% vs 66.1%), 8-세포기(90.9% vs 37.0%) 및 상실배기(89.4% vs 23.6%)는 이들간에 유의적(P<0.05)인 차이가 있었으며, 배반포기로의 발달율은 체내성숙난자가 50.0%로서 체외성숙난자의 0.8%보다는 유의적으로 높았다. 활성화를 유도한 난자를 mSOF 배양액으로 체외배양을 실시하였을 때 분할율은 81.0%로서 TCM-199 +oviduct cell 의 64.3% 및 Ml6 배양액의 51.6%보다는 높게 나타났다. 배반포기로의 발달율은 mSOF 배양액에서는 3.4%가 발달하였으나, TCM-199+ oviduct cell 배양액과 M16 배양액에서는 전혀 발달이 이루어지지 않았다. 이상의 결과는 포유동물 난자의 단위발생의 유도 및 체외배양시 난자의 공급원, 난자의 활성화 방법 및 배양조건 등이 차후 단위발생란의 체외발생율에 크게 영향을 미칠 수 있는 근거를 제시해 준다.

This study was conducted to examine whether activation treatments, source of oocytes and culture conditions affect in vitro developmental ability of caprine oocytes. Mature Korean native goats were pretreated with intravaginal CIDR for 10 days. The goats were then treated with a single intramuscular injection of 1,000 IU PMSG on Day 8 or twice daily injection of a total of 70 mg FSH for 3 days from Day 8 of CIDR insertion for superovulation. All the goats were injected with 10 mg PGF/sub 2a/ on Day 8 and 400 IU hCG on Day 10 of CIDR. Oocytes were surgically collected by oviduct flushing(in vivo maturation) or direct follicle aspiration(in vitro maturation) through mid-ventral incision at 35 h after hCG injection. Fifteen to twenty oocytes were placed in TCM-199 medium containing 25 mM Hepes and hormones under mineral oil at 39℃ in a humudified atmosphere of 5% CO₂ in air for 22 to 24 h. After maturation, the oocytes were activated by electric stimulation or ionomycin + 6-DMAP. The activated oocytes were then cultured in M16, TCM-199 and mSOF media supplemented with proteins at 39℃ for 6 to 7 days. Activation treatments did not affect cleavage of the oocytes. The cleavage rates were 64.1% (41/64) in oocytes activated by electric stimulation and 76.5% (218/285) in oocytes activated by ionomycin + 6-DMAP. The proportion of development to blastocyst was 15.6% (34/218) in oocytes activated by ionomycin + 6-DMAP, but activation by electric stimulation did not support embryos developed beyond morula stage. There were no differences in the cleavage rates of activated oocytes experiencing in vivo (86.8%, 66/76) and in vitro maturation (69.0%, 127/184). However, the development rate to blastocyst stage was significantly (P<0.05) higher for oocytes matured in vivo (50.0%, 33/66) compared to in vitro (0.8%, 1/127). Culture conditions did not affect the cleavage of -activated oocytes. The cleavage rates were 51.6% (49/95) in M16, 64.3% (18/28) in TCM-199 and 81.0% (145/179) in mSOF, respectively. By contrast, the development rate of activated oocytes to stage was greater (P<0.05) for oocytes cultured in mSOF medium (23.4%, 34/145) than in M16 or TCM-199 (0.0%). Our results suggest that source of oocytes and culture conditions are major factors affecting in vitro development of caprine parthenogenetic oocytes.

#Activation #Oocyte #Ionomycin #6-DMAP #In vivo #mSOF #Blastocyst #Caprine

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박희성

소속기관 경남과학기술대학교 동물생명과학과

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 36 이용수 39

김태숙

소속기관 진주산업대학교 동물생명과학과.동물생명산업지역협력연구센터

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 11 이용수 9

이윤희

소속기관 진주산업대학교 동물생명과학과 동물생명산업지역협력연구센터

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 9 이용수 3

정수영

소속기관 진주산업대학교 동물생명과학과.동물생명산업연구센터

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 11 이용수 10

이명열

소속기관 진주산업 대학교 동물생명과학과ㆍ동물생명산업지역협력연구센터

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 13 이용수 14

진종인

소속기관 Institute of Agriculture and Life Science

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 20 이용수 31

박준규

소속기관 경상대학교

주요연구분야 사회과학 > 인류학 농수해양학 > 축산학

논문수 22 이용수 22

이지삼

소속기관 진주산업대학교 동물생명과학과.동물생명산업지역협력연구센터

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 15 이용수 19

김충희

소속기관 진주산업대학교 동물생명과학과ㆍ동물생명산업지역협력연구센

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 9 이용수 7

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