Adiponectin Gene Cloning and Its Expression in Insect Cell Expression System

Yuh, In Suh; Sheffield, Lewis G.

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자료유형: 학술저널

저자정보: Yuh, In Suh (College of Animal Life Sciences, Kangwon National University) Sheffield, Lewis G. (Department of Dairy Science, University of Wisconsin)

저널정보: 한국동물번식학회 한국동물번식학회지 한국동물번식학회지 제36권 제3호

발행연도: 2012.1

수록면: 193 - 198 (6page)

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This study was to examine expression of the recombinant full-length adiponectin (recombinant adiponectin) in insect ovarian cell culture system and to characterize structural properties of the recombinant adiponectin secreted in medium. Gene construct encoding the recombinant adiponectin contained N-terminal collagen-like domain (110 Amino Acids, AAs), C-terminal globular domain (137 AAs) and C-terminal peptides for detection with V5 antibody (26 AAs included adaptor peptide) and purification using the 6xHis tag (6 AAs). The approximate molecular weight of the product (monomer) was 35 kDa. Molecular mass species of the expressed recombinant adiponectin were monomer (~35 kDa), dimer (~70 kDa), trimer (~105 kDa) and hexamer (~210 kDa). The major secreted species were the LMW forms, such as monomer, dimer, and trimer. There was MMW of hexamer as minor form. HMW multimers (~300 kDa) were shown as a tracer or not detected on the SDS-PAGE in several experiments (data not shown). The multimer forms in this study were not compatible to those in animal or human serum and adipose tissue by other researcher's study in which the major multimer forms were HMW. By protein denaturing experiments with reducing reagent (${\beta}$-MeOH), anionic detergent (SDS) and heat ($95^{\circ}C$) on the SDS-PAGE, not all adiponectin multimers seemed to have disulfide bond linked structure to form multimers. The recombinant adiponectin which expressed in insect ovarian cell culture system seemed to have the limitation as full physiological regulator for the application to animal and human study.

#Recombinant adiponectin #Multimer #Insect ovarian cell #SDS-PAGE

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이 논문의 저자 정보

Yuh, In Suh

소속기관 College of Animal Life Sciences, Kangwon National University

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 1 이용수 1

Sheffield, Lewis G.

소속기관 Department of Dairy Science, University of Wisconsin

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

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