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저자정보
김현미 (농촌진흥청 국립농업과학원 농업생명자원부 신작물개발과) 황현식 (농촌진흥청 국립농업과학원 농업생명자원부 신작물개발과) 이석찬 (성균관대학교 유전공학과) 조수현 (강원대학교 의학전문대학원 생리학교실) 김범기 (농촌진흥청 국립농업과학원 농업생명자원부 신작물개발과)
저널정보
한국응용생명화학회 Journal of applied biological chemistry Journal of applied biological chemistry 제53권 제4호
발행연도
2010.1
수록면
189 - 194 (6page)

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Xenopus oocyte을 이용하여 식물 aquaporin 단백질의 물 흡수 활성을 측정하기 위한 최적의 조건을 확립하기 위하여 애기장대의 AtPIP2-1유전자를 클로닝하여 cRNA 제작용 vector, buffer osmolarity, hypoosmotic shock 처리시간, 발현 단백질의 localization등을 검토한 결과, Xenopus ${\beta}$-globin 유전자의 5'과 3' UTR(untranlation region)'염기서열을 갖고 있는 pGEMHE vector가 단백질 생산에 더욱 효과적이며, 이 vector를 시용하였을 경우 hypoosomotic stress는 1/2ND buffer에서 6분간 처리시 가장 큰 차이를 볼 수 있었으며, 애기장대 AtPIP2-1단백질과 GFP를 결합시켜 발현시킬 경우 GFP가 plasmamembrane에 위치하는 것을 보아 올바른 subcelluar localization이 이루어지는 것을 확인할 수 있었다.
#aquaporin activity #AtPIP2-1 #Xenopus oocyte

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참고문헌 (19)

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Geiger D. / 2010 / Guard cell anion channel SLAC1 is regulated by CDPK protein kinases with distinct Ca2+ affinities / Proc Natl Acad Sci USA 107:8023~8028 google schola Jahn T.P. / 2004 / Aquaporin homologues in plants and mammals transport ammonia / FEBS Lett 574:31~36 google schola Kaldenhoff R. / 2007 / Characterization of plant aquaporins / Methods Enzymol 428:505~531 google schola Liman E.R. / 1992 / Subunit stoichiometry of a mammalian K+ channel determined by construction of multimeric cDNAs / Neuron 9:861~871 google schola Luyten K. / 1995 / Fps1, a yeast member of the MIP family of channel proteins, is a facilitator for glycerol uptake and efflux and is inactive under osmotic stress / EMBO J 14:1360~1371 google schola

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