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저자정보
김재현 (국립보건안전연구원 독성부) 박창원 (국립보건안전연구원 독성부) 박정식 (국립보건안전연구원 독성부) 홍연탁 (국립보건안전연구원 독성부) 김효정 (국립보건안전연구원 독성부) 이주한 (국립보건안전연구원 독성부) 이헌수 (국립보건안전연구원 독성부) 이동권 (성균관대학교 약학대학)
저널정보
한국응용약물학회 The journal of applied pharmacology : the official journal of the Korean Society of Applied Pharmacology The journal of applied pharmacology : the official journal of the Korean Society of Applied Pharmacology 제1권 제1호
발행연도
1993.1
수록면
58 - 64 (7page)

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DNA addicts induced by putative chemical related to carcinogenesis were detected and determined by $^{32}$P-Postlabelling assay after exposure of 4 compounds comprising two auto dyes (amaranth, new coccine) and two flavonoid compounds (rutin, quercetin) to ICR mouse. DNA was isolated from mouse liver and digested enzymatically to deoxyribonucleoside 3'-monophosphate. The postincubation of DNA digests with nuclease Pl before $^{32}$P-labelling enhanced the technique's sensitivity. Nuclease Pl cleaves deoxyribonucleoside 3'-mono-phosphates of normal nucleotides to deoxyrihonucleosides which do not serve as substrates for polynucleotide kinase, while most of addicts were found to be totally or partially resistant to the 3'-dephosphorylating action of nuclease Pl. The adducted deoxyribonucleoside 3'-monophosphate was converted to 5'-$^{32}$P-labelled deoxynucleoside 3',5'-bisphosphate by T4 polynucleotide kinase. The nucleotides were separated by anion-exchange thin layer chromatography(TLC) on polyethyleneimine cellulose by 4-dimensional or 2-dimensional TLC then detected by autoradiography. The results show that DNA addicts were detected in liver DNA of ICR mouse after administration of amaranth and quercetin by 2-dimensional and/or 4-dimensional TLC.
#$^{32}$P-postlabelling #amaranth #new cocaine #rutin #quercetin #DNA adduct

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