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전문잡지
저자정보
정구민 (서울대학교 의과대학 산부인과학교실) 방명걸 (서울대학교 의과대학 산부인과학교실) 김석현 (서울대학교 의과대학 산부인과학교실) 신창재 (서울대학교 의과대학 산부인과학교실) 김정구 (서울대학교 의과대학 산부인과학교실) 문신용 (서울대학교 의과대학 산부인과학교실) 이진용 (서울대학교 의과대학 산부인과학교실) 장윤석 (서울대학교 의과대학 산부인과학교실)
저널정보
대한생식의학회 대한불임학회잡지 대한불임학회잡지 제19권 제2호
발행연도
1992.1
수록면
143 - 152 (10page)

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The present experiments were focussed to modify a short slow-cooling protocol used for freezing of early stage embryo(Testart et al., 1986) and also to apply the modified method for the cryopreservation of hamster oocytes with Zona or without. The protocol was modified by changing the 4-step equilibration into 1-step and the 1-step thawing into 2-step. The oocytes were added in 1.5M PROH and 0.1M Sucrose, seeded at $-7^{\circ}C$, slow cooled($0.3^{\circ}C$/min) to $-30^{\circ}C$ before plunging to $-196^{\circ}C$. The oocytes were thawed at $23-25^{\circ}C$ air(20sec/150sec) and/or 33-35 water(10sec). The survival of the frozen-thawed oocytes was determined by morphologic criteria and their fertilizing ability was also estimated by Sperm Penetration Assay(SPA) system(Chang et al, 1990) using fertile men semen sample. One-step equilibration showed slightly higher survival rate(83.9% vs. 71.0%) and fertilization rate(83.9% vs. 71.0%) compared with four-step(p>0.05). And two-step thawing(air & water exposing) of oocytes frozen after 1-step equilibration showed significantly higher survival rate(96.3%) than one-step thawing at air(85.2%) or water(65.0%) only(p<0.05). Therefore, by the modified method(l-step equilibration & 2-step thawing), Zona-intact(ZI) and Zona-free(ZF) oocytes were frozen and thawed. ZI-oocytes showed significantly higher survival rate(95.4%, 308/323 vs. 67.6%, 240/355) than ZF-oocytes(P<0.01). But the survival of ZF-oocytes was as high as ZI-oocytes in fourteen of twenty-four replicates. ZI-oocytes was also significantly higher fertilization rate($92.4{\pm}8.9%$ vs. $63.7{\pm}18.5%$) and higher mean number of penetrated sperm($6.2{\pm}4.2$ vs. $3.9{\\pm}3.3$) than ZF-oocytes, but not higher than control(fresh oocytes;$99.3{\pm}2.4%$, $8.4{\pm}4.2$)(P<0.001). Conclusively, this modified method will contribute to freeze effectively the hamster oocytes for simplifing of the logical consideration of performing SPA and also to freeze the human and other animal oocytes.

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