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학술저널
저자정보
한성규 (제주대학교 농화학과) 유장걸 (제주대학교 농화학과) 강순선 (제주대학교 농화학과) 류기중 (제주대학교 농화학과) 오성국 (제주대학교 농화학과)
저널정보
한국응용생명화학회 Applied Biological Chemistry Applied Biological Chemistry 제33권 제1호
발행연도
1990.1
수록면
93 - 100 (8page)

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Petunia, 당근 및 대두의 Protoplast를 전기자극법으로 융합시킬 때의 적정 전기자극 조건과, petunia protoplast의 융합율 그리고 또는 viability에 대한 calcium, magnesium, pretense, trypsin, triton X-100, concanavalin A, dimethyl sulfoxide(DMSO), glycerol monooleate 그리고 spermine의 영향을 조사하였다. Protoplast pearl chain 형성을 위한 교류의 주파수와 전압은, Petunia의 경우 10kHz-20 V/cm와 1 MHz-60 V/cm, 당근의 경우에 100 kHz-40 V/cm와 $1\;MHz-40{\sim}80\;V/cm$, 그리고 대두의 경우에 $1\;MHz-40{\sim}80\;V/cm$가 양호하였다. Protoplast융합을 위한 최적 직류 처리조건은, petunia의 경우에 교류를 1MHz, 60 V/cm (15 sec) 처리한 후 직류를 2.5 kV/cm, $40\;{\mu}sec$ 처리했을 때였는데, 이 때 Protoplast의 생존율 과 융합율은 각각 45 %와 10 %였다. 당근과 대두의 경우는 처리시간에 관계없이 직류 2.5 V/cm 이하에서는 융합이 일어나지 않았고, 2.5 V/cm 이상에서는 protoplast가 파괴되었다. Calcium은 전기자극융합을 촉진시켰는데, 최적 농도는 140 mM이었고 이 때 protoplast의 생존율과 융합율은 43 %와 11 %였다. Magnesium은 융합촉진효과가 없었으나 calcium이 존재할 때는 융합을 촉진하였는데, calcium 140 mM일 때 최적 magnesium농도는 140mM이었고, 이때의 생존을과 융합율은 각각 45%와 13%였다. 융합배지에 protease, trypsin, triton X-100, concanavalin A, DMSO, glycerol monooleate, spermine을 처리했을 때 융합율은 대조구(11.2 %)에 비해 각각 2.4, 2.1, 1.6, 1.4, 1.8, 1.5, 2.2배로 증가하였고, 생존율은 각각 37 %, 35 %, 38 %, 41 %, 31 %, 37 %, 42 %로 대조구(45.2 %)에 비해 모두 저하되었다.
#electrofusion #plant protoplasts

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