토끼 구강점막 상피세포 성장에 미치는 환경인자의 영향

윤문영; 박희정; 이두훈; 장인근; 박정극; 김우식

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자료유형: 학술저널

저자정보: 윤문영 (동국대학교 공과대학 생명.화학공학과) 박희정 (동국대학교 공과대학 생명.화학공학과) 이두훈 (동국대학교 공과대학 생명.화학공학과) 장인근 (동국대학교 공과대학 생명.화학공학과) 박정극 (동국대학교 공과대학 생명.화학공학과) 김우식 (연세대학교 공과대학 화공.생명공학부)

저널정보: 한국화학공학회 화학공학 화학공학 제43권 제1호

발행연도: 2005.1

수록면: 103 - 109 (7page)

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토끼 구강점막 상피 세포의 분리 및 일차배양 방법, 세포성장에 미치는 환경인자의 영향에 대한 연구를 T75-플라스크를 사용하여 수행하였다. 토끼의 구강점막조직을 채취(biopsy)한 후 트립신(trypsin) 효소처리방법을 이용하여 $0.25cm^2$ 점막 조직으로부터 $1.92{\pm}0.59{\times}10^6$개의 점막 상피세포를 회수할 수 있었다. 회수한 점막 상피세포를 50 mg/L BPE(bovine pituitary extract), $5.0{\mu}g/L$ EGF(human recombinant epidermal growth factor), 0.15 mM $Ca^{2+}$을 함유한 K-SFM(keratinocyte serum free medium)을 10 mL씩 사용하여 일차 배양한 결과 8일 만에 배양용기표면에 세포가 포화(confluent)하게 성장하였고 배가시간은 2.45일이었다. 일차 배양한 세포를 회수한 후 배지종류, 배지부피, 첨가물 종류가 상피세포성장에 미치는 영향을 조사하였다. 혈청첨가배지는 세포성장에 부정적인 효과를 나타냈고, 혈청농도가 증가함에 따라 세포성장은 큰 변화가 없었다. 배지부피가 증가함에 따라 세포성장은 감소하였고, 칼슘농도가 증가할수록 세포성장은 증가하였으며 2.0 mM에서 최적치를 나타내었다. 이상으로 토끼 구강점막 상피세포를 T75-플라스크를 사용하여 배양하는 경우 50 mg/L BPE, $5.0{\mu}g/L$ EGF, 2.0 mM $Ca^{2+}$을 함유한 K-SFM을 10 mL씩 사용하는 조건이 가장 적합하였고 배가시간은 1.32일이었다. 이러한 연구결과는 향후 점막뿐만 아니라 피부, 각막 등 인체에 존재하는 상피세포배양을 위한 공정개발이나 생물반응기 설계에 유용한 정보를 제공할 것으로 사료된다.

#Keratinocyte #Mucosa #Medium Supplements #Calcium #Environmental Factors #Serum-free Medium

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