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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학술저널
- 저자정보
- 발행연도
- 2020.1
- 수록면
- 158 - 166 (9page)
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Paenibacillus woosongensis의 xylanase 유전자를 클로닝하고 그 염기서열을 결정하였다. Xylanase 유전자는 xyn10A 로 명명되었으며, 481 아미노잔기로 구성된 단백질을 코드하는 1,446개 뉴클레오티드로 구성되었다. 추론된 아미노산배열에 따르면 Xyn10A는 glycosyl hydrolase family 10 xylanase와 상동성이 높은 활성영역과 카르복실 말단에 탄수화물을 결합하는 것으로 추정되는 영역이 포함된 다영역효소로 확인되었다. DEAE-Sepharose와 Phenyl-Separose 컬럼 크로마토그래피 과정을 통해 P. woosongensis xyn10A 유전자를 함유한 재조합 대장균의 균체 파쇄상등액으로부터Xyn10A를 정제하였다. 정제된 Xyn10A의 아미노 말단 배열이 GIANGSKF로 결정되었으며 이는 SignalP5.0 server로예측된 signal peptide의 다음 아미노산 배열과 정확하게 일치하였다. 정제된 Xyn10A는 33 kDa 크기의 절단된 단백질이며 균체내 분해에 의해 카르복시 말단에서 CBM이 제거된 것으로 판단된다. 정제된 효소는 최적 pH와 온도가 6.0 과 55−60℃이며 oat spelt xylan에 대한 반응 동력학적 계수Vmax와 Km이 298.8 U/mg과 2.47 mg/ml로 각각 나타났다. 효소는 birchwood xylan이나 oat spelt xylan보다 arabinoxylan 에 대한 활성이 높았으며 para-nitrophenyl-β-xylopyranoside에대해 낮은 활성을 보였다. Xyn10A의 활성은 Cu2+, Mn2+과SDS에 의해서 크게 저해되었으며 K+, Ni2+과 Ca2+에 의해는 상당하게 증진되었다. 또한 이 효소는 xylobiose 보다 중합도가 큰 자일로올리고당을 분해하였으며, 자일로올리고당의 최종 가수분해 산물은 xylose와 xylobiose로 확인되었다.
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참고문헌 (27)
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Sharma N / 2017 / Microbial xylanases and their industrial applications as well as future perspectives : a review / Global J. Biol. Agric. Health Sci 6:5~12
Valenzuela SV / 2010 / Recombinant expression of an alkali stable GH10 xylanase from Paenibacillus barcinonensis / J. Agric. Food Chem 55:4814~4818
Imjongjairak S / 2015 / Paenibacillus curdlanolyticus B-6xylanase Xyn10C capable of producing a doubly arabinose-substituted xylose, α-L-Araf-(1→2)-[α-L-Araf-(1→3)]-D-Xylp, from rye arabinoxylan / Enzyme Microb. Technol 72:1~9
윤기홍 / 2012 / Paenibacillus woosongensis의 Xylanase 유전자 클로닝과 특성분석 / 미생물학회지 48(2):141~146
Sakka M / 2011 / Characterization of Paenibacillus curdlanolyticus B-6Xyn10D, a xylanase that contains a family 3 carbohydrate-binding module / Appl. Environ. Microbiol 77:4260~4263
Valenzuela SV / 2010 / Recombinant expression of an alkali stable GH10 xylanase from Paenibacillus barcinonensis / J. Agric. Food Chem 55:4814~4818
Imjongjairak S / 2015 / Paenibacillus curdlanolyticus B-6xylanase Xyn10C capable of producing a doubly arabinose-substituted xylose, α-L-Araf-(1→2)-[α-L-Araf-(1→3)]-D-Xylp, from rye arabinoxylan / Enzyme Microb. Technol 72:1~9
윤기홍 / 2012 / Paenibacillus woosongensis의 Xylanase 유전자 클로닝과 특성분석 / 미생물학회지 48(2):141~146
Sakka M / 2011 / Characterization of Paenibacillus curdlanolyticus B-6Xyn10D, a xylanase that contains a family 3 carbohydrate-binding module / Appl. Environ. Microbiol 77:4260~4263
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