Characterization of a Fibrinolytic Enzyme Secreted by Bacillus velezensis BS2 Isolated from Sea Squirt Jeotgal

Zhuang Yao; 김정아; 김정환

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자료유형: 학술저널

저자정보: Zhuang Yao 김정아 김정환

저널정보: 한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제29권 제3호

발행연도: 2019.1

수록면: 347 - 356 (10page)

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Bacillus sp. BS2 showing strong fibrinolytic activity was isolated from sea squirt (munggae) jeotgal, a traditional Korean fermented seafood. BS2 was identified as B. velezensis by molecular biological methods. B. velezensis BS2 grows well at 15% NaCl and at 10oC. When B. velezensis BS2 was cultivated in TSB broth for 96 h at 37oC, the culture showed the highest fibrinolytic activity (131.15 mU/μl) at 96 h. Three bands of 27, 35 and 60 kDa were observed from culture supernatant by SDS-PAGE, and fibrin zymography showed that the major fibrinolytic protein was the 27 kDa band. The gene (aprEBS2) encoding the major fibrinolytic protein was cloned, and overexpressed in heterologous hosts, B. subtilis WB600 and E. coli BL21 (DE3). B. subtilis transformant showed 1.5-fold higher fibrinolytic activity than B. velezensis BS2. Overproduced AprEBS2 in E. coli was purified by affinity chromatography. The optimum pH and temperature were pH 8.0 and 37oC, respectively. Km and Vmax were 0.15 mM and 39.68 μM/l/min, respectively, when N-succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA was used as the substrate. AprEBS2 has strong α-fibrinogenase and moderate β-fibrinogenase activity. Considering its high fibrinolytic activity, significant salt tolerance, and ability to grow at 10oC, B. velezensis BS2 can be used as a starter for jeotgal.

참고문헌 (33)

참고문헌 신청

구옥경 / 2016 / Korean traditional fermented fish products: jeotgal / Journal of Ethnic Foods 3(2):107~116

Guan L / 2011 / Analysis of the cultivable bacterial community in jeotgal, a Korean salted and fermented seafood, and identification of its dominant bacteria / Food Microbiol 28:101~113

Fukui Y / 2012 / Bacterial communities in fish sauce mash using culture-dependent and –independent methods / J. Gen. Microbiol 58:273~281

Han KI / 2014 / Bacterial community dynamics of salted and fermented shrimp based on denaturing gradient gel electrophoresis / J. Food Sci 79:M2516~M2522

Lee SH / 2015 / Bacterial community dynamics and metabolite changes in myeolchi-aekjeot, a Korean traditional fermented fish sauce, during fermentation / Int. J. Food Microbiol 203:15~22

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