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자료유형
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저자정보
저널정보
한국잠사학회 International Journal of Industrial Entomology International Journal of Industrial Entomology 제39권 제1호
발행연도
2019.1
수록면
14 - 21 (8page)

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Genome editing by CRISPR/Cas9, a third-generation gene scissor in molecular breeding at the genome level, is attracting much attention as one of the breeding techniques of the future. In this study, genetic and phenotypic analysis was used to examine the responsiveness of the Bakokjam variety of the silkworm Bombyx mori to molecular breeding using CRISPR/Cas9 in editing the white egg 2 (w-2) gene. The nucleotide sequence of the w-2 gene was analyzed and three different guide RNAs (gRNA) were prepared. The synthesized gRNA was combined with Cas9 protein and then analyzed by T7 endonuclease I after introduction into the Bm-N silkworm cell line. To edit the silkworm gene, W1N and W2P gRNA and Cas9 complexes were microinjected into silkworm embryos. Based on the results of microinjection, the hatching rate was 16-24% and the incidence of mutation was 33-37%. The gene mutation was verified in the heterozygous F1 generation, but no phenotypic change was observed. In F2 homozygotes generated by F1 self-crosses, a mutant phenotype was observed. These results suggest that silkworm molecular breeding using the CRISPR/Cas9 system is possible and will be a very effective way to shorten the time required than the traditional breeding process.

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안희영 / 2013 / 발효누에분말 투여가 orotic acid 유발 흰쥐에 미치는 지방간 개선 효과 / 생명과학회지 23(6):789~795 dbpia Barrangou R / 2007 / CRISPR provides acquired resistance against viruses in prokaryotes / Science 315:1709~1712 google schola Basua S / 2015 / Silencing of end-joining repair for efficient site-specific gene insertion after TALEN/CRISPR mutagenesis in Aedes aegypti / Proc Natl Acad Sci USA 112:4038~4043 google schola Christian M / 2010 / Targeting DNA double-strand breaks with TAL effector nucleases / Genetics 186:757~761 google schola Doudna JA / 2014 / The new frontier of genome engineering with CRISPR-Cas9 / Science 346:1078~1086 google schola

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