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저자정보
저널정보
대한산부인과학회 Obstetrics & Gynecology Science Obstetrics & Gynecology Science 제54권 제9호
발행연도
2011.1
수록면
499 - 507 (9page)

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목적내피세포를 제거한 자궁동맥 평활근세포에 난포호르몬을 투여하여 자궁동맥 평활근세포가 난포호르몬의 직접적인 표적조직인지와 난포호르몬이 자궁동맥 평활근세포에서 직접적으로 extracellular signal-regulated kinases (ERK2/1) 활성화하는지 여부를 파악하여 난포호르몬의 자궁동맥 혈관확장 중에서 내피세포-비의존성 기전을 알아보기 위하여 본 연구를 시행하였다. 연구방법만삭임신의 양에서 절제된 자궁동맥을 대상으로 콜라겐 분해효소로 내피세포를 제거하였다. 내피세포가 제거된 자궁동맥 평활근 분절은소화효소처리 후에 평활근세포를 수집하여 성장배지에서 계대배양하였다. 혈관 내피세포와 평활근 상태의 평가는 항평활근 알파-액틴 단일클론 항체, 항내피세포 산화질소 합성효소 단일클론 항체, 항caveolin-1 다클론 항체를 처리하여 중복 면역형광 염색과 흐름세포측정으로 판정하였다. 자궁동맥 평활근세포에 난포호르몬을 농도를 달리하여(10-14 M에서 10-6 M까지) 투여하여 전체 세포 추출물에 대하여 항인산 특이 mitogen activated protein kinases (MAPKs) 다클론 항체로 ERK2/1 인산화의 western blot 분석을 하였다. 난포호르몬 수용체 길항제인 ICI 182,780으로 전처치한 후에 다시 난포호르몬을 낮은 농도(10-10 M)와 높은 농도(10-7 M)로 투여하여 인산화 ERK2/1의 western blot 분석을 하여 전처치하지 않은 경우와 비교하였다. 결과평활근세포의 전형적인 “hill and valley” 양상과 세포 내에 평활근 알파-액틴과 caveolin-1이 뚜렷하게 염색되었다. 흐름세포측정 분석에서 평활근 알파-액틴과 caveolin-1은 각각 99.96%와 99.98%가 발현되었지만 내피세포 산화질소 합성효소 단백질은 26.12%에서만 발현되었다. 난포호르몬의 농도의 증가에 따라 인산화 ERK2/1의 발현은 이상성 증가반응을 보였다. 난포호르몬이 저농도(10-14-10-10 M)에서는 ERK2/1의 인산화는 용량-의존적으로 증가하였지만, 고농도(10-9-10-8 M)에서는 ERK2/1의 인산화는 오히려 감소하였으며, 약물농도인 초고농도(10-7-10-5 M)에서는 ERK2/1의 인산화가 급격하게 증가하였다. 난포호르몬 수용체 길항제인 ICI 182,780으로 전처치하면 난포호르몬을 저농도(10-10 M) 혹은 고농도(10-7 M)로 투여하더라도 ERK2/1 인산화는 소멸되었다. Reverse transcription-polymerase chain reaction 분석에서 난포호르몬 알파-수용체와 베타-수용체는 자궁동맥 평활근과 자궁동맥 평활근세포에서 모두 발현되었다. 결론자궁동맥 평활근은 난포호르몬 수용체를 지니고 있는 난포호르몬의 표적조직이며, 난포호르몬의 혈관확장 작용에는 자궁동맥 평활근세포에서 직접적인 ERK2/1 활성화를 통한 혈관내피 비의존성 기전도 존재한다는 것을 확인할 수 있다.
#난포호르몬 #자궁동맥 평활근 #혈관확장 #ERK2/1 #Estrogen #Uterine artery smooth muscle #Vasodilatation #ERK2/1

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