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저자정보
저널정보
대한산부인과학회 Obstetrics & Gynecology Science Obstetrics & Gynecology Science 제45권 제4호
발행연도
2002.1
수록면
15 - 15 (1page)

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목적 : 동결보존 후 해빙할 경우 대부분의 포유류 배아에서 생존율이나 양질 배아의 회수율 및 임신율 등이 동결하지 않은 신선배아에 비해 현저하게 낮다. 본 실험에서는 Vero 세포 공배양이 동결보존후 해빙한 ICR계 생쥐 2-세포기 배아 발생에 유익한 영향을 미치는지 여부를 알아보고자 한다.재료 및 방법 : 5-6 주령의 ICR 계 암컷 생쥐로부터 후기 2-세포기 배아를 얻어 1.5M 1,2-propanediol과 0.1M sucrose를 혼합한 동결보존액에서 동결시킨 다음 4단계 해빙방법을 거쳐 해빙한 후 2-세포기 배아만을 회수하여 실험재료로 사용하였다. 대조군으로서 Ham's F-10와 10% FBS을 섞은 배양액과 실험군으로서 Vero 세포가 단층으로 깔린 기본 배양액에 각각 배양하여 부화가 이루어질 때까지 배아 발달과정을 24시간 간격으로 5일 동안 관찰하였다.결과 : 총 473개의 2-세포기 배아를 동결시켰으며 해빙 후 467개 (98.7%)의 2-세포기 배아를 회수하였다. 그중 2개의 할구 모두 건강한 배아가 299개 (64.0%), 1개의 할구가 변성된 것이 83개 (17.8%)였다. 2개의 할구 모두 건강한 299개 중 290개의 2-세포기 배아를 실험에 사용하였다. 배양 시작 24시간 후 4-세포기 이상의 배아발생률은 대조군 (61.3%)과 실험군 (69.3%)간에 유의한 차이가 없었다 (p=0.161). 그러나 96시간, 120시간 이후에는 대조군에 비해 Vero 세포 공배양군인 실험군에서 유의하게 높은 발생률을 보였다 (각각 14.4% 대 30.7%, (p=0.002); 9.0% 대 24.0%, (p=0.001)).
#Vero 세포 #공배양 #동결보존 #해빙 #생쥐 배아 #Vero cell #Coculture #Cryopreservation #Thaw #Mouse embryo

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