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목적 : 인간 황체화 과립막세포 배양시 세포외 ATP가 세포자멸사 과정에 미치는 영향을 알아보고 이러한 과정이 hCG에 의하여 어떠한 영향을 받는지를 알아보고자 하였다. 연구 방법 : 체외수정술을 시행 받은 환자들을 대상으로 난자채취시 획득한 황체화 과립막세포에 각기 실험조건에 따라 다른 농도의 ATP (0, 0.1, 0.25, 0.5, 0.75 mM)와 5 IU의 hCG를 첨가하였다. 24시간 배양 후 patch clamp, flow cytometry, confocal microscopy를 이용하여 purinoceptor의 활성 및 미토콘드리아의 기능적 변화를 측정하였다.결과 : Fura-2를 이용하여 ATP 첨가 후 세포내 칼슘이온 변화를 측정한 결과 세포내 칼슘저장소로부터 칼슘이온의 이동에 의한 세포내 칼슘이온의 증가가 나타났다. Patch clamp 실험 결과 ATP 처리에 의해 outward Ca2+-activated K+ current가 측정되었으며, 이는 ATP가 우선적으로 P2Y type의 수용체와 결합함을 시사한다. JC-1 처리 후 미토콘드리아의 막전위 측정과 Annexin-V를 이용하여 flow cytometry로 세포자멸사의 정도를 정량 분석한 결과 미토콘드리아의 탈분극 및 세포자멸사 (7.88% vs. 18.57%)가 ATP농도에 의존적으로 증가함을 확인할 수 있었다. 이러한 미토콘드리아의 탈분극 및 세포자멸사는 hCG (5IU) 첨가에 의하여 역전되었다 (18.57% vs. 6.32%).

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