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자료유형
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저자정보
저널정보
대한산부인과학회 Obstetrics & Gynecology Science Obstetrics & Gynecology Science 제47권 제4호
발행연도
2004.1
수록면
695 - 701 (7page)

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목적 : 재조합 아데노 연관 바이러스 rAAVCMVp53를 생산하기 위해서 3가지 플라스미드 pAAVp53, pAAVLacZ 벡터 플라스미드, packaging 플라스미드, helper 플라스미드를 사용하여 cotransfection 방법을 통해 아데노바이러스 오염이 없는 순수 rAAVCMVp53을 생산하고자 하였다. 연구 방법 : 벡터 플라스미드 (pAAVp53, pAAVLacZ), AAV를 암호한 부분에 2개의 p5 promoter를 가지는 플라스미드 pXX2 그리고 복제할 수 있는 능력을 지닌 플라스미드 pXX6 이용하여 293 세포주에 Ca++-phospate 침전법을 통해 cotransfection을 시행하고 CsCl 밀도구배 초원심분리를 이용하여 재조합 아데노 연관 바이러스를 생산하였다. 생성과 적정확인은 PCR과 dot-blot을 통해 분석하였다. 결과 : PCR 법에 의해 p53과 LacZ 유전자를 가지는 재조합 아데노 연관 바이러스의 생성을 확인하였으며 LacZ 유전자를 포함하는 재조합 아데노 연관 바이러스를 자궁경부암 세포주 HeLa, HT3, HeLaS3, CaSki 등에 감염시킨 후 X-gal 염색을 통해 이입을 확인하였다. 결론 : 벡터플라스미드, packaging 플라스미드, helper 플라스미드를 이용하여 cotransfection을 통한 아데노바이러스의 오염이 없는 재조합 아데노 연관 바이러스를 생산할 수 있게 되었다. 향후 cotransfection의 자세한 연구를 통해 높은 titer의 순수한 재조합 아데노 연관 바이러스를 다량으로 생산할 수 있을 것으로 사료된다.
#재조합 아데노 연관 바이러스 #Packaging 플라스미드 #Helper 플라스미드 #자궁경부암 #Cotransfection #Adeno-associated virus #Cotransfection #Packaging plasmid #Helper plasmid #Cervical cancer

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/ 1993 / Vaccination with irradiated tumor cells engineered to secrete murine granulocyte-macrophage colony- stimulating factor stimulates potent, specific, and long-lasting google schola / 1994 / An efficient and flexible system for construction of adenovirus vectors with insertions or deletions in early regions 1 and 3 91 : 8802 ~ 8806 google schola / 1996 / Gene delivery to skeletal muscle results in sustained expression and systemic delivery of a therapeutic protein 93 : 14082 ~ 14087 google schola / 1996 / In vivo model of adeno-associated virus vector persistence and rescue 70 : 3235 ~ 3241 google schola / 1996 / Second-strand synthesis is a rate- limiting step for efficient transduction by recombinant adeno-associated virus vectors 70 : 3227 ~ 3234 google schola

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