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논문 기본 정보

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저널정보
대한산부인과학회 Obstetrics & Gynecology Science Obstetrics & Gynecology Science 제46권 제5호
발행연도
2003.1
수록면
4 - 4 (1page)

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목적 : 최근 인간 배아의 동결 및 해빙이 동결보존액으로 1,2-propanediol (PROH)을 사용함으로써 성공적으로 이루어지고 있다. 배아를 PROH에 노출 시 평형온도 조절의 중요성이 보고된 바 있다. 본 실험은 2-세포기 생쥐 배아를 PROH에 노출 시 평형온도와 노출 시간에 따른 생쥐 배아의 발생에 미치는 영향을 알아보고, 2-세포기 생쥐 배아의 동결 전에 동결보존액에서의 적정 노출 온도와 시간을 알아보고자 한다.연구 방법 : 5-6주령의 ICR계통의 암컷 생쥐로부터 2-세포기 배아를 획득하여 1.5 M PROH를 포함하는 인산완충용액 (phosphate buffered saline, PBS)에 37℃, 상온 (22-24℃), 4℃에서 각각 0분 (대조군), 10분, 30분씩 노출시킨 후 1, 0.5, 0 M PROH를 포함하는 PBS에 각 실험군의 배아를 순서대로 각각 5분씩 두어 PROH를 완전히 제거한 후 0.4% 소혈청알부민 (bovine serum albumin, BSA)이 포함된 Ham's F-10에서 배양하여 배아의 발생률을 비교 관찰하였다. 한편, 상온과 4℃에서 1.5 M PROH를 포함하는 동결보존액에 2-세포기 생쥐배아를 각각 10분씩 노출시킨 후 동결-해빙하여 배아의 발생률을 비교 관찰하였다.결과 : 37℃ PROH에서의 노출군은 대조군에 비해 배아 발생률이 유의하게 저해되었고 (0분: 54.8%, 10분: 8.3%, 30분: 5.4%, P=0.047, 0.038), 상온 노출군에서는 대조군에 비해 노출시간이 길어질수록 배아 발생률이 감소하였으나 유의한 차이는 없었다 (0분: 47.2%, 10분: 28.3% 30분: 23.7%). 한편 상온과 4℃에서 각각 동결보존 전에 PROH에 노출 후 동결-해빙하였을 때 배아의 발생률은 대조군에 비해 낮았으나 유의한 차이는 없었고 (대조군: 57.1%, 상온: 25.7%, 4℃: 30.8%) 4℃ 노출군이 상온 노출군에 비해 배아 발생률이 높게 나타났으나 유의한 차이는 없었다.

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