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논문 기본 정보

자료유형
학술저널
저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제24권 제6호
발행연도
2014.1
수록면
835 - 842 (8page)

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Haloperoxidase (HPO, E.C.1.11.1.7) is a metal-containing enzyme oxidizing halonium species, which can be used in the synthesis of halogenated organic compounds, for instance in the production of antimicrobial agents, cosmetics, etc., in the presence of halides and H2O2. To isolate and evaluate a novel non-metal HPO using a culture-independent method, a cassette PCR library was constructed from marine seawater in Japan. We first isolated a novel HPO gene from Pseudomonas putida ATCC11172 by PCR for constructing the chimeric HPO library (HPO11172). HPO11172 showed each single open-reading frame of 828 base pairs coding for 276 amino acids, respectively, and showed 87% similarity with P. putida IF-3 sequences. Approximately 600 transformants screened for chimeric genes between P. putida ATCC11173 and HPO central fragments were able to identify 113 active clones. Among them, we finally isolated 20 novel HPO genes. Sequence analyses of the obtained 20 clones showed higher homology genes with P. putida or Sinorhizobium or Streptomyces strains. Although the HPO A9 clone showed the lowest homology with HPO11172, clones in group B, including CS19, showed a relatively higher homology of 80%, with 70% identy. E. coli cells expressing these HPO chimeric genes were able to successfully bioconvert chlorodimedone with KBr or KCl as substrate.
#haloperoxidase #marine metagenome #chimeric library #cassette PCR

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Almeida M / 2001 / Vanadium haloperoxidases from brown algae of the Laminariaceae family / Phytochemistry 57 : 633 ~ 642 google schola Iffland A / 2001 / Changing the substrate specificity of cytochrome c peroxidase using directed evolution / Biochem. Biophys. Res. Commun 286 : 126 ~ 132 google schola Itoh N / 2001 / Cloning and biochemical characterization of Co2+-activated bromoperoxidase-esterase (perhydrolase) from Pseudomonas putida IF-3 strain / Biochim. Biophys. Act google schola Jannun R / 1987 / Bromoperoxidase from the marine snail Murex trunculis / Comp. Biochem. Physiol 88 : 917 ~ 922 google schola Laemmli UK / 1970 / Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 / Nature 227 : 680 ~ 685 google schola

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