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Anabaena sensory rhodopsin is a seventransmembrane protein that uses al-trans/13-cis retinal as achromophore. About 22 residues in the retinal-binding pocketof microbial rhodopsins are conserved and important to controlthe quality of absorbing light and the function of ion transportin the presence of all-trans retinal at dark. Here, we mutatedPro206 to Glu or Asp, of which the residue is conserved asAsp among al other microbial rhodopsins, and the absorptionmaximum and pKa of the proton acceptor group were measuredby absorption spectroscopy at various pHs. Anabaena rhodopsinwas expressed best in Escherichia coli in the absence of extraleader sequence when exogenous al-trans retinal was added.The wild-type Anabaenamaximum changes betwen pH 4 and 11. In addition, Pro206Aspshowed 46 nm blue-shift at pH 7.0. Pro206Glu or Asp maychange the contribution to the electron distribution of theretinal that is involved in the major role of color tuning forthis pigment. The critical residue Ser86 (Asp 96 position inbacteriorhodopsin: proton donor) for the pumping activitywas replaced with Asp, but it did not change the protonpumping activity of Anabaena rhodopsin.

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