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Ornithine decarboxylase (ODC) antizyme is akey regulatory protein in the control of cellular polyamines.We have isolated two distinct ODC antizyme cDNA clones(AZS and AZL) from a flounder (Paralichthys olivaceus)brain cDNA library. Their sequences revealed that bothclones required translational frameshifting for expression.Taking +1 frameshifting into account, AZS and AZL productswere 221 and 218 amino acid residues long, respectively,and shared 83.3% amino acid sequence identity. Comparisonof the structure and nucleotide sequence of the antizymegenes showed that the genes were highly conserved inflounder, zebrafish, mouse, and human. A phylogenetictree was constructed, based on the antizyme amino acidsequences from various species. The presence of the twotypes of antizyme mRNA species in brain, kidney, liver, andembryo was confirmed by using the reverse transcriptionpolymerasechain reaction (RT-PCR) and Northern blotanalysis. Recombinant proteins of flounder ODC antizymes,containing His-Nus-S tag at the amino-terminus, wereoverexpressed as His-AZL and His-AZS fusion proteins inEscherichia coli BL21 (DE3) pLys by using the pET-44a(+) expression vector.

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