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More than twenty years have passed since theapproval of the first recombinant DNA product for therapeuticuse (recombinant human insulin, 1982). However, thebiotechnology industry is still facing a shortage of manufacturingcapacity due to the increasing demand of therapeutic proteins.This demand has prompted the search for a growing numberof biological production systems but, nevertheless, the Gramnegativebacterium Escherichia coli remains one of the mostattractive production hosts. This review highlights the mostimportant features and developments of plasmid vector design,emphasizing the different reported strategies for improvingthe expression and secretion of heterologous proteins usingthe cellular machinery of E. coli.

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