미생물을 이용한 트립신 과대 생산 연구

김종희; 홍순광

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자료유형: 학술저널

저자정보: 김종희 홍순광

저널정보: 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 한국미생물·생명공학회지 제36권 제1호

발행연도: 2008.1

수록면: 28 - 33 (6page)

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The expression vector (pWHM3-TR1R2) for sprT gene encoding Streptomyces griseus trypsin (SGT) followed by two regulatory genes, sgtR1 and sgtR2, was introduced into Streptomyces lividans TK24 and Streptomyces griseus IFO 13350. Various media with different compositions were used to maximize the productivity of SGT in the recombinant strains. The SGT productivity was best when the transformant of S. lividans TK24 was cultivated in R2YE medium (0.74 unit/mL) at 5 days of cultivation. C5/L (0.66 unit/mL) medium also gave a good productivity, but Livid(0.08 unit/mL) and NDSK (0.06 unit/mL) yielded poor productivities. S. griseus IFO 13350/ pWHM3-TR1R2 produced SGT by 1.518 unit/mL (C5/L), 1.284 unit/mL (R2YE), 0.932 unit/mL (NDSK), and 0.295 unit/mL(Livid) at 7 days of cultivation, which was much higher than those from S. lividans TK24/TR1R2. The SGT protein was purified from the culture broth of S. griseus IFO 13350/pWHM3-TR1R2 in C5/L to homogeneity via ammonium sulfate fractionation, and CM-sepharose and SP-sepharose column chromatographies. The specific activity of purified SGT was 69,252 unit/mg, and the final purification fold and recovery yield were 6.5 and 1.4%, respectively.

#Streptomyces griseus #bacterial trypsin #sprT #sgtR1 #sgtR2. ......... ...

참고문헌 (22)

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Bradford, M. M. / 1976 / A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / Anal. Biochem 7

CHOI, EUN-YONG / 2007 / Distinct Regulation of the sprC Gene Encoding Streptomyces griseus Protease C from Other Chymotrypsin Genes in Streptomyces griseus IFO13350 / Journal

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Chi, W.-J. / 2001 / Overexpression of SGPA and SGT induces morphological changes in Streptomyces lividans / J. Microbiol. Biotehnol 11 : 1077 ~ 1086

Choi, S.-S. / 2001 / Overexpression of the sprD gene encoding Streptomyces griseus protease D stimulates actinorhodin production in Streptomyces lividans / J. Microbiol 39 :

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김종희

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홍순광

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