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vector for Escherichia coli was developed based on thepTORG plasmid, a derivative of pET32a. This vector, namedpT7MT (GenBank Accession No DQ50436), carries a T7promoter and it drives the downstream gene encodingMetalothionein 2A (MT2A). There are in-framed multiplecloning sites (MCS) downstream of the MT2A gene. A targetgene can be cloned into the MCS and fused to the C-terminalof the MT2A gene in a compatible open reading frame (ORF)MT2A allows the purification of fusion proteins by metalchelating affinity chromatography, known as Ni2+-afinitychromatography. Using this expresion vector, we successfullygot the stable and high-yield expression of MT2A-GST andMT2A-Troponin I fusion proteins. These two proteins wereeasily purified from the supernatant of cell lysates by one-stepNi2+-afinity chromatography. The final yields of MT2A-GSTculture, respectively. Taken together, our data sugest thatpT7MT can be applied as a useful expression vector for stableand high-yield production of fusion proteins.

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