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In adipocytes, insulin stimulates glucose transport primarily by promoting the translocation of GLUT4 to the plasma membrane. Requirements for Ca2+/ calmodulin during insulin-stimulated GLUT4 trans-location have been demonstrated; however, the mechanism of action of Ca2+ in this process is unknown. Recently, myosin II, whose function in non-muscle cells is primarily regulated by phos-phorylation of its regulatory light chain by the Ca2+/calmodulin-dependent myosin light chain ki-nase (MLCK), was implicated in insulin-stimulated GLUT4 translocation. The present studies in 3T3- F442A adipocytes demonstrate the novel finding that insulin significantly increases phosphorylation of the myosin II RLC in a Ca2+addition, ML-7, a selective inhibitor of MLCK, as well as inhibitors of myosin II, such as blebbistatin and 2,3-butanedione monoxime, block insulin- stimul-ated GLUT4 translocation and subsequent glucose transport. Our studies suggest that MLCK may be a regulatory target of Ca2+/calmodulin and may play an important role in insulin-stimulated glucose trans-port in adipocytes.

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