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배경: 그람음성 막대균은 반고체 Casein hydrolysate agar 및 이 배지와 조성이 비슷한 반고체 cystine tryptic agar (CTA)에 배양하여 실온에 보존하면 1년 이상 생존한다. 그러나 CTA에서 배양한 blaVIM-2 유전자 보유 세균을 실온에 보관 후에 imipenem 내성을 소실하는 균주가 있다. 국내에서 분리된 VIM-2 및 IMP-1 생성균을 대상으로 실온 보관에 따른 이들 유전자의 소실 빈도와 유전자 소실에 따른 항균제 최소억제농도의 변화 및 이들 유전자의 위치를 규명하고자 하였다. 방법: 1995-2000년에 세브란스병원 내원 환자의 검체에서 분리된 세균을 대상으로 하였다. MBL 생성 균주는 modified Hodge 시험과 double disk synergy 시험으로 선별하고, blaIMP-1과 blaVIM-2 유전자를 PCR로 검출하였다. 대상균주를 CTA 시험관에 접종 및 배양하여 실온에 보관하고 경과 일 수에 따른 내성소실을 시험하였다. VIM-2유전자 위치 확인을 위해서 PFGE 및 hybridization를 시행하였다. 결과: VIM-2 및 IMP-1 생성 P. aeruginosa 8균주와 A. baumannii 2균주를 CTA 실온에서 보관하였을때, 3일 후에 내성유전자를 소실한 균주가 있었고, 15주일 후에는 90%의 균주가 내성유전자를 소실하였다. blaVIM-2 혹은 blaIMP-1 유전자를 소실한 균주에 대한 imipenem의 MIC범위는 P. aeruginosa의 경우 32-128 μg/mL에서 0.5-8 μg/mL로, A. baumannii의 경우 32 μg/mL에서 0.25-4 μg/mL으로 낮아졌다. blaVIM-2 유전자는 균주에 따라서 약 50-100 kb와 약 400 kb의 plasmid에 위치하였다. 결론: 실온에서 보존된 균주는 시간의 경과에 따라서 차츰 내성 유전자를 소실하므로, 실온에 보관했던 균주를 사용한 연구를 할 때에 modified Hodge test와 double disk synergy 시험과 같은 MBL생성 선별시험 및 MBL 유전자 보유를 확인하여야 한다.

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