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학술저널
저자정보
저널정보
한국동물위생학회(구 한국가축위생학회) 한국가축위생학회지 한국가축위생학회지 제37권 제4호
발행연도
2014.1
수록면
263 - 271 (9page)

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In this study, we developed a cost and time saving one-step multiplex RT-PCR for the simultaneous detection and differentiation of swine influenza viruses (SIV) and 2009 pandemic influenza H1N1 virus (pH1N1). The one-step multiplex RT-PCR using four sets of primer was confirmed to be capable of detection of all SIV subtypes and differential diagnosis of major SIV subtype H1, H3 and pH1N1 on individual or mixed viral culture samples. The sensitivity of the multiplex RT-PCR was determined to be at least 2−6 HA/25 L of the presented SIVs, providing sufficient efficacy for a routine SIV monitor-ing in diagnostic laboratories. In addition, compared with the conventional RT-PCR methods that cannot avoid the carryover DNA contamination, the developed RT-PCR applied with the uracil DNA glyco-sylase (UNG) system was proven to prevent a false positive reaction by carryover contamination of the pre-amplified DNA. In conclusion, the one-step RT-PCR with UNG system could be applicable to de-tect and differentiate of SIV from the viral cultures without worry of carryover DNA contamination in clinical laboratories.
#Swine influenza viruse #SIV) #Multiplex RT-PCR #Uracil DNA glycosylase #UNG) #Differential diagnosis

목차

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참고문헌 (25)

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Aslanzadeh J / 2004 / Preventing PCR amplification carryover contamination in a clinical laboratory / Annals Clin Lab Sci 34 : 389 ~ 396 google schola Aunyaratana T / 2011 / Single-step multiplex reverse transcription polymerase chain reaction assay for detection and differentiation of the 2009 H1N1 Influenza A virus pandem google schola Chiapponi C / 2012 / Multiplex RT-PCR assay for differentiating European swine influenza virus subtype H1N1, H1N2, H3N2 / J Virol Methods 184 : 117 ~ 120 google schola Duncan BK / 1981 / The Enzymes / Academic Press : 565 ~ 586 google schola Fu G / 2010 / Establishment of a multiplex RT-PCR assay to detect different lineages of swine H1 and H3 influenza A viruses / Virus Genes 41 : 236 ~ 240 google schola

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