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So-Yun Lee (한경대학교) Munkhzaya Byambaragchaa (한경대학교) Jeong-Soo Kim (한경대학교) Hun-Ki Seong (한경대학교) Myung-Hwa Kang (호서대학교) Kwan-Sik Min (한경대학교)
저널정보
한국생명과학회 생명과학회지 생명과학회지 제27권 제8호
발행연도
2017.8
수록면
864 - 872 (9page)

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eCG는 다른 포유동물에서 FSH와 LH의 활성을 나타내기 때문에 성선자극 호르몬 family에서 아주 특이적이고 많은 당쇄가 수식되어진 알파와 베타의 비공유결합으로 구성되어 있다. 유전자 재조합 eCGβ/α의 생물학적 기능을 규명하기 위하여 말의 LH/CGR의 포유동물발현용 벡터를 구축하였다. 재조합 eCGβ/α의 활성분석은 말의 LH/CGR가 일시적으로 발현되는 CHO-K1 세포와 지속적으로 발현되는 PathHunter Parental 세포를 이용하여 분석하였다. 유전자 재조합 eCGβ/α는 CHO-K1 부유세포의 상층으로 효율적으로 분비되었으며, 분비량은 transfection 후 1일에서 7일까지 약 200 mIU/ml이었다. Western blot 분석결과는 재조합 eCGβ/α의 분자량은 약 40-45 kDa으로 검출되었다. eLH/CGR가 발현되는 CHO-K1 세포에서의 cAMP분비량으로 재조합 eCGβ/α의 활성을 분석하였다. 그 결과 cAMP농도는 재조합 eCGβ/α의 농도의존적으로 증가하였다. eLH/CGR가 일시적으로 발현하는 CHO-K1 세포에서 EC<SUB>50</SUB> 값은 8.1±6.5 ng이었다. 또한 일시적 및 지속적으로 eLH/CGR가 발현하는 PathHunter Parental 세포에서도 재조합 eCGβ/α의 LH 활성 분석결과 높은 활성을 나타내는 것으로 확인되었으며, 이들의 EC<SUB>50</SUB> 값은 각각 5.0±4.7 ng/ml, 4.5±5.2 ng/ml으로 나타났다. 따라서 이러한 결과에 의하면 재조합 eCGβ/α는 말의 LH/CGR가 발현하는 세포에서 생물학적 활성을 나타난다는 것을 확인하였으며, PathHunter Parental 세포에서 지속적으로 발현되는 세포의 확보는 당쇄제거에 의한 재조합 eCG의 돌연변이등에 관한 기능적인 메커니즘을 밝히는데 유용할 것으로 사료된다.

목차

Introduction
Materials and Methods
Results
References
초록

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