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방향족 화합물은 독성 환경오염물질로 생태계와 인간의 건강에 해로운 영향을 미친다. 그중 chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물은 수생생물에 독성을 나타내며 인간의 피부, 눈, 호흡기를 자극한다. 본 연구에서는 폐수의 chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물을 저렴하고 간단하게 검출하고자 재조합 미생물 바이오센서를 개발하였다. BTEX (benzene, toluene, ethylbenzene, xylene) 분해 조절 유전자 xylR를 Po’ (upstream activating sequences를 제거한 DmpR 조절단백질 promoter Po) 또는 Pu (XylR 고유의 프로모터)::lacZ 유전자(β-galactosidase 유전자)의 upstream에 연결한 플라스미드를 제작한 후, E. coli DH5α에 형질 전환하였다. 유도 화합물 존재 하에서, 아가로스에 고정된 이 재조합 바이오센서 세포는 유도 화합물에 의해 β-galactosidase를 발현하고 기질인 chlorophenol red β-D-galactopyranoside (CPRG)를 분해하여 1~2시간에 붉은색을 나타내었다. BTEX 화합물 중, 특이적으로 o-, m-, p-chlorotoluene (0.1 ㎛-100 mM) 그리고 o-, m-, p-nitrotoluene (0.1 mM-100 mM)에서 높은 반응을 나타내었으며 Po’가 Pu보다 높은 반응성을 보여주었다. 아가로스에 고정된 바이오센서는 4℃에서 21일간 보존 후에도 활성의 큰 변화 없이 안정하였으며, chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물들로 spike된 전처리 하지 않은 폐수 시료중에서도 좋은 반응을 보여 주어 폐수 중 chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물의 간단한 초기 검출에 활용될 수 있음을 제시하였다.
목차
서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
References
초록
참고문헌 (20)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Alvarez, G. S. / 2009 / Effect of various parameters on viability and growth of bacteria immobilized in sol-gel-derived silica matrices / Appl Microbiol Biotechnol 82 : 639 ~ 646
2. [학술지(정기간행물)] - Bertoni, G. / 1998 / Active recruitment of σ54 –RNA polymerase to the Pu promoter of Pseudomonas putida : role of IHF and αCTD / EMBO J 17 : 5120 ~ 5128
3. [학술지(정기간행물)] - Delgado, A. / 1994 / Genetic evidence for activation of the positive transcriptional regulator XylR, a member of the NtrC family of regulators, by effector binding / J Biol Chem 269 : 8059 ~ 8062
4. [학술지(정기간행물)] - Eustice, D. C. / 1991 / A sensitive method for the detection of beta-galactosidase transfected mammalian cells / Biotechniques 6 : 739 ~ 743
5. [학술지(정기간행물)] - Fernández, S. / 1994 / Cross-regulation by XylR and DmpR activators of Pseudomonas putida suggests that transcriptional control of biodegradative operons evolves independently of catabolic genes / J Bacteriol 176 : 5052 ~ 5058
2. [학술지(정기간행물)] - Bertoni, G. / 1998 / Active recruitment of σ54 –RNA polymerase to the Pu promoter of Pseudomonas putida : role of IHF and αCTD / EMBO J 17 : 5120 ~ 5128
3. [학술지(정기간행물)] - Delgado, A. / 1994 / Genetic evidence for activation of the positive transcriptional regulator XylR, a member of the NtrC family of regulators, by effector binding / J Biol Chem 269 : 8059 ~ 8062
4. [학술지(정기간행물)] - Eustice, D. C. / 1991 / A sensitive method for the detection of beta-galactosidase transfected mammalian cells / Biotechniques 6 : 739 ~ 743
5. [학술지(정기간행물)] - Fernández, S. / 1994 / Cross-regulation by XylR and DmpR activators of Pseudomonas putida suggests that transcriptional control of biodegradative operons evolves independently of catabolic genes / J Bacteriol 176 : 5052 ~ 5058
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