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논문 기본 정보

자료유형
학술저널
저자정보
맹보희 (광운대학교) 남동현 (광운대학교) 김용환 (광운대학교)
저널정보
한국생물공학회 KSBB Journal KSBB Journal 제24권 제6호
발행연도
2009.12
수록면
591 - 597 (7page)

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심장이상증상의 상태에서 분비되는 심장혈관호르몬인 BNP의 혈중 농도측정은 심장기능부전환자의 진단에 유용하게 이용 되고 있다. 혈청 또는 혈장에서의 BNP 농도측정은 샌드위치형태의 면역학적 검정법을 이용할 수 있으며, 이때에 항 BNP 항체를 BNP 탐지 인자로 사용할 수 있다. 특히, 탐지 인자로의 사용을 위해서는 항원항체 반응부분을 링커로 연결하여 전체 항체에 비해서 경제적이며 효율 면에서도 뛰어난 scFv의 사용이 용이하다고 판단하였고, 이에 scFv의 취약점인 대장균에서의 불용성 형태의 발현을 최소화 시키고 기능적 발현을 극대화하여 심장질환 진단용 센서의 센서 칩 항체로 사용할 수 있도록 항 BNP scFv 항체의 발현을 대장균 세포질 내에서 유도 하였다. 대장균 세포질내에서의 scFv 제작을 위하여 항 BNP scFv 항체 유전자를 pColdⅣ 벡터와 pET22b (+)벡터에 각각 클로닝한 후 발현 하였으며, 그 결과 대량 생산의 장점이 있는 강력한 T7 promoter를 지닌 pET22b (+) 벡터를 이용하여 낮은 온도에서 단백질의 발현을 느리게 유도할 때 적절한 단백질 접힘 현상이 일어나 기능적인 scFv의 발현이 극대화됨을 확인하였다. 또한 IPTG의 투여에 있어서 그 농도가 높아지면 빠른 단백질 유전자의 전사를 도와 발현율이 증가하지만 과도한 농도의 IPTG 투여는 세포내의 독성을 일으켜 단백질의 생산을 저해할 수 있다는 결론에 도달하였으며, 연구를 통하여 개발한 항 BNP scFv 항체가 오직 BNP 항원과의 결합특이성을 가진다는 사실도 확인 가능 하였다.
#BNP #anti-BNP #scFv

목차

Abstract
서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
요약
REFERENCES

참고문헌 (12)

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1. [학술지(정기간행물)] - Tetin, S. Y. / 2006 / Interactions of two monoclonal antibodies with BNP: high resolution epitope mapping using fluorescence correlation spectroscopy / Biochemistry 45 : 14155 ~ 14165 google schola 2. [학술지(정기간행물)] - Deborah, A. / 2004 / B-type natriuretic peptide; congestive heart failure / Clin Lab Sci. 17 : 53 ~ google schola 3. [기타자료] - Brophy, S. E. / 2007 / United States patent Application Publication. 60: 734, 964 google schola 4. [학술지(정기간행물)] - Morrison, L. K. / 2002 / Utility of a rapid B-Natriuretic peptide assay in differentiating congestive heart failure from lung disease in patients presenting with dyspnea / J. Am Coll Cardio. 39 : 202 ~ 209 google schola 5. [학술지(정기간행물)] - Longenecker, K. L. / 2009 / Crystal structure and thermodynamic analysis of diagnostic mAb 106.3 complexed with BNP 5-13 (C10A) / Proteins. 76 : 536 ~ 547 google schola

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