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내냉성 세균인 Pseudomonas mandelii로부터 lipase 유전자(lipT)를 클로닝하고 염기서열을 분석하였다. 열린해독틀(open reading frame)은 1,686 bp로 구성되어 있고, 562개의 아미노산을 코딩한다. 서열분석 결과 많은 세린 효소에서 발견되는 Gly-X-Ser-X-Gly 모티프가 존재한다(Gly-His-Ser-Leu-Gly). 재조합 LipT 단백질은 대장균에서 주로 inclusion body 형태로 발현되었다. 니켈 친화성 크로마토그라피 방법으로 LipT 단백질을 분리하였으며 소량의 LipT 단백질이 refold 되었다. 이 효소는 p-nitrophenyl butyrate (C4)과 p-nitrophenyl octanoate (C8)에 대해 기질 특이성을 나타내었다.
목차
Introduction
Materials and Methods
Results and Discussion
Acknowledgement
References
초록
참고문헌 (18)
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1. [학술지(정기간행물)] - Ahn, J. H. / 1999 / Identification of the tliDEF ABC transporter specific for lipase in Pseudomonas fluorescens SIK W1 / J. Bacteriol 181 : 1847 ~ 1852
2. [학술지(정기간행물)] - Bell, P. J. / 2002 / Prospecting for novel lipase genes using PCR / Microbiology 148 : 2283 ~ 2291
3. [학술지(정기간행물)] - Chahinian, H. / 2009 / Distinction between esterases and lipases: comparative biochemical properties of sequence-related carboxylesterases / Protein Pept. Lett 16 : 1149 ~ 1161
4. [학술지(정기간행물)] - 김세일 / 200710 / EzTaxon: A web-based tool for the identification of prokaryotes based on 16S ribosomal RNA gene sequences / International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology 57 (10) : 2259 ~ 2261
5. [학술지(정기간행물)] - Chung, C. W. / 2009 / Export of recombinant proteins in Escherichia coli using ABC transporter with an attached lipase ABC transporter recognition domain (LARD) / Microb. Cell Fact 8 : 11 ~
2. [학술지(정기간행물)] - Bell, P. J. / 2002 / Prospecting for novel lipase genes using PCR / Microbiology 148 : 2283 ~ 2291
3. [학술지(정기간행물)] - Chahinian, H. / 2009 / Distinction between esterases and lipases: comparative biochemical properties of sequence-related carboxylesterases / Protein Pept. Lett 16 : 1149 ~ 1161
4. [학술지(정기간행물)] - 김세일 / 200710 / EzTaxon: A web-based tool for the identification of prokaryotes based on 16S ribosomal RNA gene sequences / International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology 57 (10) : 2259 ~ 2261
5. [학술지(정기간행물)] - Chung, C. W. / 2009 / Export of recombinant proteins in Escherichia coli using ABC transporter with an attached lipase ABC transporter recognition domain (LARD) / Microb. Cell Fact 8 : 11 ~
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