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고세균 Sulfolobus acidocaldarius의 기능유전체학 연구를 위하여 피리미딘 생합성 유전자군의 pyrEF 유전자에 근거한 피리미딘 영양요구주를 구축하였다. 원균주는 정상적인 pyrEF 존재하에서 5-fluoroorotic acid를 첨가하면 성장이 불가능하나 피리미딘 영양요구주는 성장이 가능한 원리를 활용하였다. 자외선을 이용하여 얻어진 5-FOA 첨가에 저항성을 갖는 돌연변이주를 얻었으며, 두 돌연변이주 KH1U와 KH2U는 각각 pyrE 유전자 부분의 점돌연변이와 삽입돌연변이를 갖는 돌연변이주임을 알 수 있었다. 이 두 돌연변이 균주는 5-FOA의 첨가에 의하여 이 세포를 사멸시킬 수 있는 능력이 사라짐을 확인하였다. 정상적인 pyrEF 유전자를 갖는 Sulfolobus-E. coli 플라스미드를 이용하여 보완실험을 수행한 결과 KH2U 돌연변이주는 다시 5-FOA에 대한 저항성을 잃어버렸으며, 배지 내에 피리미딘의 첨가가 없어도 생존할 수 있는 능력을 보여주는 원균주와 같은 표현형으로 회귀함을 확인하였다. 이 연구는 차후 고세균 Sulfolobus acidocaldarius의 유전자 불활성화를 통한 유전학연구에 효율적인 도구로 사용되기에 유용한 연구로 생각된다.
목차
Introduction
Materials and Methods
Results and Discussion
Acknowledgements
References
초록
참고문헌 (24)
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1. [학술지(정기간행물)] - Allers, T / 2005 / Archaeal genetics: the third way / Nat. Rev. Genet 6 : 58 ~ 73
2. [학술지(정기간행물)] - Aravalli, R. N / 1997 / Shuttle vectors for hyperthermophilic archaea / Extremophiles 1 : 183 ~ 192
3. [학술지(정기간행물)] - Barry, E. R / 2006 / DNA replication in the archaea / Microbiol. Mol. Biol. Rev 70 : 876 ~ 887
4. [학술지(정기간행물)] - Berkner, S. / 2007 / Small multicopy, non-integrative shuttle vectors based on the plasmid pRN1 for Sulfolobus acidocaldarius and Sulfolobus solfataricus, model organisms of the (cren-)archaea / Nucleic Acids Res 35 : e88 ~
5. [학술지(정기간행물)] - Berkner, S / 2008 / Genetic tools for Sulfolobus spp.: vectors and first applications / Arch. Microbiol 190 : 217 ~ 230
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5. [학술지(정기간행물)] - Berkner, S / 2008 / Genetic tools for Sulfolobus spp.: vectors and first applications / Arch. Microbiol 190 : 217 ~ 230
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