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신혜진 (서울의과학연구소) 권순호 (서울의과학연구소) 박지명 (서울의과학연구소) 권순효 (순천향대학병원) 이경률 (서울의과학연구소) 김영진 (서울의과학연구소) 이상후 (서울의과학연구소)
저널정보
한국분석과학회 분석과학 분석과학 제23권 제6호
발행연도
2010.12
수록면
531 - 536 (6page)

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본 연구에서는 이온쌍 역상 HPLC/UV를 이용하여 건강한 한국인에서 분리된 말초혈액단핵구(PBMCs)에서 이노신 5’-일인산 탈수소효소(IMPDH)의 활성을 측정하였다. IMPDH는 이노신 5’-일인산(IMP)을 잔토신 5’-일인산(XMP)로 전환시키는 베타-니코틴아마이드 아데닌 디뉴클로티드 수화물(β-NAD+) 의존성 탈수소효소이며, 이것의 활성은 기질인 IMP와 조효소인 NAD+의 존재 하에서 분해한 PBMCs로부터 생성된 XMP에 해당하는 HPLC 크로마토그램을 정량적으로 분석함으로써 측정하였다. 생성된 XMP는 260 ㎚에서 검출하였다. 이동상으로는 7 mM tetra-n-butylammonium hydrogen sulfate가 포함된 37 mM potassium dihydrogen phosphate (pH 5.5)와 methanol의 혼합용액(85:15, v/v)을 사용하였으며, 유속은 1 mL/min이었다. 정량 범위는 0.2-50.0 μM이었으며, 이 때 정량 한계(LOQ)는 0.2 μM이었다. 또한, 본 연구에서 확립된 시험법은 일내 정밀성(0.88-1.47%), 정확성(98.74-99.99%)과 일간 정밀성(0.85-5.24%), 정확성(99.95-101.65%)을 측정하여 검증하였다. 11명의 건강한 한국인에 대한 IMPDH 활성 측정 결과, 18.29-36.60 n㏖/h/㎎ protein(평균값 27.70 ± 6.28 n㏖/h/㎎ protein)이었다.
#IMP #XMP #IMPDH activity #PBMCs #HPLC

목차

요약
Abstract
1. 서론
2. 실험
3. 결과 및 고찰
4. 결론
감사의 글
참고문헌

참고문헌 (17)

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1. [학술지(정기간행물)] - W. Wang / 1997 / / Biochemistry 36 (28) : 8479 ~ 8483 google schola 2. [학술지(정기간행물)] - A. C. Allison / 2000 / / Immunopharmacology 47 (2-3) : 85 ~ 118 google schola 3. [학술지(정기간행물)] - E. M. Eugui / 1993 / / Ann. N. Y. Acad. Sci 685 : 309 ~ 329 google schola 4. [학술지(정기간행물)] - M. A. Fleming / 1996 / / Biochemistry 35 (22) : 6990 ~ 6997 google schola 5. [학술지(정기간행물)] - A. C. Allison / 1975 / / Lancet 2 (7946) : 1179 ~ 1183 google schola

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