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인간조직인자는 혈액응고인자 factor VII 과 복합체를 형성하며 연속적인 혈액응고 연쇄반응을 촉매하는 효소 활성체이다. 복합체 형성에 필수적인 이 조직인자의 세포 외 부분이, 기존의 융합 단백질 및 히스티딘 말단이 없는 새로운 발현 벡터에 의해 대장균 내에서 과량 발현 되었다. 봉입체 형태로 발현된 재조합 인간조직인자는 DEAE-Sephacel 크로마토그라피 기술을 적용하여 분리, 정제 및 구조적 복원이 동시에 시도 되었다. 정제된 재조합 단백질은 SDS-PAGE 분석에서 순수한 형태로 나타났으며, 생물학적 활성도 또한 기존의 조직인자와 거의 동등함을 보였다. 본 연구의 발현 및 정제 시스템은 이전의 보고에서 보여진 방법들에 비해 단백질 분해효소를 사용하지 않아 추가적인 크로마토그라피 과정이 필요 없어 좀 더 효율적이기 때문에 기존의 발현 시스템에 대해 대체할 수 있는 매우 유용한 방법으로 제공된다.
목차
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
Acknowledgments
References
초록
참고문헌 (8)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Bradford, M. A / 1976 / Rapid and sensitive method for quantification of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / Anal. Biochem. 72 : 248 ~ 254
2. [학술지(정기간행물)] - Gao, B / 1998 / A simple and rapid method for purifying the extracellular domain of human tissue factor / Thromb. Res. 91 : 249 ~ 253
3. [학술지(정기간행물)] - Guan, M / 2002 / Production of extracellular domain of human tissue factor using maltose-binding protein fusion system / Protein Expr. Purif. 26 : 229 ~ 234
4. [학술지(정기간행물)] - Ruf, W / 1991 / Characterization of factor VII association with tissue factor in solution / J. Biol. Chem. 266 : 15719 ~ 15725
5. [학술지(정기간행물)] - Ruf, W / 1999 / Importance of factor VIIa Gla-domain residue Arg-36 for recognition of the macromolecular substrate factor X Gla-domain / Biochemistry 38 : 1957 ~ 1966
2. [학술지(정기간행물)] - Gao, B / 1998 / A simple and rapid method for purifying the extracellular domain of human tissue factor / Thromb. Res. 91 : 249 ~ 253
3. [학술지(정기간행물)] - Guan, M / 2002 / Production of extracellular domain of human tissue factor using maltose-binding protein fusion system / Protein Expr. Purif. 26 : 229 ~ 234
4. [학술지(정기간행물)] - Ruf, W / 1991 / Characterization of factor VII association with tissue factor in solution / J. Biol. Chem. 266 : 15719 ~ 15725
5. [학술지(정기간행물)] - Ruf, W / 1999 / Importance of factor VIIa Gla-domain residue Arg-36 for recognition of the macromolecular substrate factor X Gla-domain / Biochemistry 38 : 1957 ~ 1966
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