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논문 기본 정보

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저널정보
한국식물병리학회 The Plant Pathology Journal 한국식물병리학회지 제14권 제2호
발행연도
1998.4
수록면
177 - 183 (7page)

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느타리버섯 세균성갈색무늬병의 병원세균인 Pseudomonas tolaasii에 대한 특이적 분자marker를 얻기 위해 tolaasin 독소의 생성에 관여하는 DNA 절편을 클로닝하였다. Tolaasin은 lipodepsipeptide 독소로서 P. tolaasii의 병원성 결정인자로 알려져 있으며, 또한 P. tolaasii를 white line reacting organisms(WLRO)s와 흰침강성 대치배양 하였을 때 흰침강선(white line) 형성에 관여하는 것으로도 알려져 있다. Rifampicin 저항성 P. tolaasii 균주를 pSUP2021 : : Tn5를 가지고 있는 대장균 균주와 접합을 통해 흰침강선을 형성하지 못하는 돌연변이체(WL?)를 유도하였다. WL? 돌연변이체의 tolaasin 생성능력을 적혈구용혈검정과 병원성검정 그리고 배양여액의 HPLC분석에 의해 확인한 결과 모든 WL? 돌연변이체들이 tolaasin 생성능력을 상실한 것(Tol?)으로 나타났다. Cosmid인 pLAFR3에 Tol? 돌연변이체의 genomic libray를 만들고, Tn5를 가지고 있는 클론을 선발하였다. 선발된 plasmid로부터 Tn5가 삽입된 주변의 DNA 절편을 클론닝하였고, P. tolaasii에 대한 특이성 확인을 위한 probe로 이용하였다. P. tolaasii와 생태적으로 유사한 WLROs와 형광성 Pseudomonads 그리고 P. agarici, P. gingeri와 여러 Pseudomonas속 세균들의 전체 DNA를 분리하여 DNA-DNA hybridization 결과 P. tolaasii 이외의 균주에서는 전혀 hybridization band가 나타나지 않거나 P. tolaasii의 band와는 다른 RFLP를 보여주었다. 본 연구에서 클론닝된 DNA절편과 그 염기서열은 P. tolaasii의 검출과 동정에 유용하게 사용될 것이다.

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UCI(KEPA) : I410-ECN-0101-2009-481-017573122