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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학술저널
- 저자정보
- 발행연도
- 1995.3
- 수록면
- 73 - 79 (7page)
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우리나라의 감자에 발생하는 감자 Y 바이러스(potato virus Y, PVY) 중에서 PVY-O 계통에 속하는 PVY-OK를 공시하여 coat protein gene에 대한 cDNA 합성과 클로닝 및 염기서열 분석을 실시하였다. PVY-OK를 담배(Nicotiana sylvestris)에 증식하여 순화한 후 phenol 추출법으로 RNA를 정제하였다. PVY-OK RNA의 coat protein gene에 대한 cDNA 합성은 바이러스로부터 추출된 RNA로부터 M-MLV 역전사효소를 이용하여 cDNA의 lst strand를 합성하고 한쌍의 primer(PVYCP3P와 PVYCP3M)를 이용하여 polymerase chain reaction(PCR)법으로 2nd strand를 합성하였다. 여기에서 얻어진 cDNA는 pUC119 플라스미드에 삽입한 후 E. coli JM109에 형질전환시켜 선발한 결과 클론 pYK6 및 pYK17로부터 비교적 길이가 긴 cDNA가 확인되였고, pUC119에 삽입된 cDNA를 SacⅠ과 SphⅠ으로 절단한 후 exonuclease Ⅲ로 deletion시켜 dATP[a³?S]를 이용하여 dideoxy chain termination 방법으로 염기서열을 분석하여 이미 보고된 PVY-O(J), PVY-T(J), PVY-T<SUB>H</SUB>(J), PVY<SUP>N</SUP>(N) 및 PVY<SUP>N</SUP>(F) 등의 CP gene과 유사정도를 비교한 결과, 염기서열은 97.3%, 88.9%, 89.3%, 89.6와 98.5%의 유사성을 보였으며, 아미노산 배열은 97.4%, 92.5%, 92.9%, 92.9% 및 98.5%의 유사성을 나타내었다.
목차
ABSTRACT
MATERIALS AND METHODS
RESULTS AND DISCUSSION
요약
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REFERENCES
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UCI(KEPA) : I410-ECN-0101-2009-481-017550014