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저널정보
한국식물병리학회 The Plant Pathology Journal 한국식물병리학회지 제6권 제4호
발행연도
1990.12
수록면
507 - 510 (4page)

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오이 모자이크 바이러스(CMV) As系統의 satellite RNA에 대한 cDNA(pCMS A9)에 enhanced chemiluminescence(ECL)法으로 標識한 프로브를 사용하여, CMV satellite RNA 또는 그 cDNA에 대한 分子交雜檢定을 檢討하였다. CMV As, 28-19 및 O(n2) 系統의 satellite RNA를 클로닝 (pUC 119/E. coli JM 109 system)시킨 플라스미드로부터 Xba Ⅰ 및 Sac Ⅰ로 cDNA를 切斷시켜 agarose gel에서 전기영동한 후 나일론 membrane(Hybond-N?)에 轉寫시켜 ECL프로브와 交雜시킨 결과 각 satellite RNA의 cDNA에 강한 特異的交雜을 보였다. 또한 CMV As系統의 全 RNA에 대한 cDNA를 클로닝(pBR 322/E. coli HB 101 system)시키고 각 클론으로부터 정제한 플라스미드를 전기영동하여 Hybond-N?에서 分子交雜시켰을 때 satellite RNA의 cDNA가 삽입된 플라스미드에만 特異的으로 반응하였다. 한편 3系統 CMV RNA를 전기영동한 후 이 ECL프로브의 RNA에 대한 交雜을 檢定하였을 때에도 각 바이러스의 satellite RNA band만이 檢出되었다. 이들 3系統의 RNA와 satellite RNA를 갖지 않는 CMV St系統의 RNA를 dot blot 法으로 交雜시켰을 경우에는 satellite RNA를 갖는 RNA와는 500pg의 희석농도까지 交雜되었으나 St系統의 RNA와는 반응하지 않았다.
#CMV satellite RNA #hybridization #enhanced chemiluminescence(ECL) method #cDNA probe

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