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방향족 에폭사이드 기질에 대한 입체선택적 가수분해능이 우수한 Rhodotorula glutinis의 epoxide hydrolase (EH)를 codon usage를 고려한 Escherichia coli 균주에서 고효율로 발현할 수 있었다. 효모인 R. glutinis와 박테리아인 E. coli에서의 codon usage 선호도를 분석하고 그 차이를 고려하여 E. coli에서 잘 사용되지 않는 rare codon에 대한 tRNA 유전자정보가 들어 있는 pRARE plasmid를 함유한 E. coli 균주인 Rosetta(DE3)pLysS를 숙주세포로 사용하였다. R. glutinis EH를 발현시킨 재조합 E. coli를 생촉매로 사용하여 라세믹 styrene oxide 혼합물과 반응시켰을 때, (R)-styrene oxide에 대한 입체선택적 가수분해활성이 wild type R. glutinis 대비 매우 향상됨을 관찰할 수 있었다. 또한 라세믹 기질로부터 입체적으로 고순도인 99% ee 값을 갖는 광학적으로 순수한 (S)-styrene oxide를 얻을 수 있었다.
목차
영어 초록
서론
실험 및 방법
결과 및 고찰
요약
감사의 글
References
참고문헌 (11)
참고문헌 신청
Archelas, A. and R. Furstoss. 2001. Synthetic applications of epoxide hydrolases. Current Opinion in Chem. Biology 5, 112-119.
Besse, P. and H. Veschambre. 1994. Chemical and biological synthesis of chiral epoxides. Tetrahedron 50, 8885-8927.
Lee, E. Y. 2002. Epoxide hydrolase-catalyzed hydrolytic kinetic resolution for the production of chiral epoxides. Kor. J. Biotechnol. Bioeng. 17, 321-325.
Lee, E. Y., S.-S. Yoo, H. S. Kim, S. J. Lee, Y.-K. Oh and S. H. Park. 2004. Production of (S)-styrene oxide by recombinant Pichia pastoris containing epoxide hydrolase from Rhodotorula glutinis. Enzy. Microbial Technol. 35, 624-631.
Lee, S. J., H. S. Kim and E. Y. Lee. 2005. Enhanced heterologous expression of Aspergillus niger epoxide hydrolase and application to stereoselective hydrolysis of racemic epoxides. J. Korean Ind. Eng. Chem. 17,(submitted).
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Lee, E. Y. 2002. Epoxide hydrolase-catalyzed hydrolytic kinetic resolution for the production of chiral epoxides. Kor. J. Biotechnol. Bioeng. 17, 321-325.
Lee, E. Y., S.-S. Yoo, H. S. Kim, S. J. Lee, Y.-K. Oh and S. H. Park. 2004. Production of (S)-styrene oxide by recombinant Pichia pastoris containing epoxide hydrolase from Rhodotorula glutinis. Enzy. Microbial Technol. 35, 624-631.
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